【摘 要】
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甜菜M14品系是利用二倍体栽培甜菜(Beta vulgaris L.)和四倍体野生白花甜菜(Beta corollifiora Zoss.)进行种间杂交,获得杂交品种,继续同栽培甜菜回交获得的带有野生白花甜菜染色体的单体附加系,具有抗病、抗逆、耐盐、无融合生殖等优良性状。蛋白质磷酸化是最基本、最重要的共价修饰之一。磷酸化过程是动态可逆的,可逆性磷酸化蛋白质与细胞内的激酶、磷酸化酶的调控密不可分,参
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甜菜M14品系是利用二倍体栽培甜菜(Beta vulgaris L.)和四倍体野生白花甜菜(Beta corollifiora Zoss.)进行种间杂交,获得杂交品种,继续同栽培甜菜回交获得的带有野生白花甜菜染色体的单体附加系,具有抗病、抗逆、耐盐、无融合生殖等优良性状。蛋白质磷酸化是最基本、最重要的共价修饰之一。磷酸化过程是动态可逆的,可逆性磷酸化蛋白质与细胞内的激酶、磷酸化酶的调控密不可分,参与多种细胞过程,如跨膜信号、改变蛋白质的构象,从而直接调节蛋白质的活性,导致亚细胞定位的变化等。植物根系作为感知信号和运输营养的主要场所。在盐胁迫条件下,了解根系中盐胁迫的信号传导和代谢机制对于提高植物耐盐性至关重要。因此研究甜菜M14品系根部响应盐胁迫差异磷酸化蛋白质有重要意义。实验室前期对甜菜M14品系叶片盐胁迫下差异表达磷酸化蛋白质进行了分析。本试验利用非标记定量技术对不同Na Cl(0 m M、200 m M、400 m M)胁迫下甜菜M14品系根部进行磷酸化蛋白质组学分析。通过对甜菜M14品系盐胁迫后不同时间点根部酶活(SOD、POD、CAT)测定,根据结果选择Na Cl为200 m M、400 m M处理甜菜M14品系根部10 min和20 min作为研究甜菜M14品系根部应答磷酸化蛋白质组学的处理条件,对甜菜M14品系根部总蛋白提取、酶解、除盐以及磷酸化富集,质谱鉴定的结果通过Proteome Discover 2.2分析,将Na Cl处理组(200 m M、400 m M)和对照组(0 m M)相比,共鉴定差异磷酸化蛋白1599个。为进一步研究盐胁迫下根部差异磷酸化蛋白质,通过GO分类以及相关参考文献对鉴定得到的磷酸化蛋白进行功能注释及分类,根据其生物学功能主要分为九大类,主要包括细胞结构(6.1%)、代谢(25.5%)、折叠与降解(3.7%)、蛋白质合成(9.4%)、信号转导的蛋白激酶(13.8%)、胁迫与防御(8.3%)、转录(17.1%)、转运(13.9%)、未知(2.3%)。其中参与代谢、转录、转运和信号转导的相关磷酸化蛋白所占比例较大,说明这些磷酸化蛋白质主要参与甜菜根部应答盐胁迫。通过对甜菜M14品系根部差异磷酸化蛋白质功能和KEGG数据库代谢通路选取参与植物转录、代谢、信号转导、运输等途径中变化倍数反映强烈的15个差异磷酸化蛋白质的编码基因在转录水平进行q RT-PCR检测,绘制甜菜M14品系根部差异表达磷酸化蛋白质参与代谢途径网络图谱。本研究为全面揭示甜菜M14品系根部耐盐机制以及根部磷酸化蛋白质应答盐胁迫调控模式奠定坚实的基础。
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