【摘 要】
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类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一种常见的慢性、炎症性自身免疫疾病,患者的伴随着关节肿胀、疼痛等特征。由于RA病因不清,目前的治疗措施只能缓解患者病情,但也会带来一定的副作用。宫血间充质干细胞是一种新型的干细胞,源于女性月经血,具有多项分化潜能和免疫调节等功能。近年来,Men SCs已经被用于多种疾病的治疗研究中,取得了一定的效果。但关于Men SCs治疗RA还鲜
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类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一种常见的慢性、炎症性自身免疫疾病,患者的伴随着关节肿胀、疼痛等特征。由于RA病因不清,目前的治疗措施只能缓解患者病情,但也会带来一定的副作用。宫血间充质干细胞是一种新型的干细胞,源于女性月经血,具有多项分化潜能和免疫调节等功能。近年来,Men SCs已经被用于多种疾病的治疗研究中,取得了一定的效果。但关于Men SCs治疗RA还鲜有报道,因此,本研究通过实验探讨了Men SCs在治疗RA的效果。首先在体外通过LPS刺激RAW264.7巨噬细胞6h后,通过transwell共培养体系与Men SCs共培养24h后。进行流式细胞实验、细胞免疫荧光、western blot和实时荧光定量PCR等,验证了Men SCs在体外对巨噬细胞向M1型极化具有抑制作用,可以下调M1型巨噬细胞相关炎症因子的表达。同时通过RANKL体外刺激RAW264.7建立破骨细胞分化模型,通过transwell共培养体系Men SCs共培养。TRAP染色检测Men SCs对破骨细胞生成与骨吸收功能的影响;实时荧光定量PCR和western blot法验证了Men SCs在体外能抑制RAW264.7分化形成破骨细胞。在体内,通过弗氏不完全佐剂诱导大鼠CIA模型,经尾静脉移植Men SCs后,通过酶联免疫吸附法检测小鼠血清中白介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的含量;踝关节进行苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE）及免疫组化染色,进行滑膜病理学分析观察。发现尾静脉注射Men SCs可以抑制CIA大鼠踝关节的变形肿胀、血液中风湿因子含量以及滑膜增生。根据以上结果,我们得出以下结论:1.Men SCs可以有效抑制巨噬细胞向促炎M1型极化,降低IL-6等相关炎症因子的表达,该作用可能与NFκb通路被抑制有关。2.Men SCs可以有效抑制巨噬细胞分化为破骨细胞。3.经尾静脉注射Men SCs可有效缓解CIA大鼠关节肿胀程度;减少关节腔滑膜增生和软骨损伤。本研究有助于阐明MSC对免疫为缓解作用机制,为未来基因修饰MSCs靶向治疗以及与表观药物联合治疗提供重要的理论依据,为类风湿性关节炎的治疗提供新思路,为以后的临床应用奠定了一定的理论基础。
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