【摘 要】
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环状RNA在真核生物体内普遍存在,通过吸附mi RNA、结合其母源基因、结合蛋白质和编码蛋白等方式参与畜禽的生长发育和疾病发生等生物学过程。课题组前期通过对鸡肝脏组织高通量测序发现了大量的circRNA。胰岛素降解酶基因对雄性动物的繁殖、人类癌症的形成以及细胞的增殖、分化和凋亡等均具有调控作用,本研究在测序基础上克隆了鸡胰岛素降解酶基因环状转录本（circIDE）,分析了其分子特征和表达规律,在鸡
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环状RNA在真核生物体内普遍存在,通过吸附mi RNA、结合其母源基因、结合蛋白质和编码蛋白等方式参与畜禽的生长发育和疾病发生等生物学过程。课题组前期通过对鸡肝脏组织高通量测序发现了大量的circRNA。胰岛素降解酶基因对雄性动物的繁殖、人类癌症的形成以及细胞的增殖、分化和凋亡等均具有调控作用,本研究在测序基础上克隆了鸡胰岛素降解酶基因环状转录本（circIDE）,分析了其分子特征和表达规律,在鸡的细胞LMH和DF-1细胞系中过表达circIDE,分析了circIDE对细胞增殖的影响。论文主要结论如下:（1）本研究首先克隆了鸡circIDE分子的全长序列,分析了circIDE的分子特性和表达规律。结果显示,circIDE全长为1332 bp,分子呈环状结构,具有RNase R耐受性,主要分布在细胞质中,时序表达谱分析发现其在肝脏、心脏和十二指肠中呈逐渐上升趋势。对比其在正常和矮小体型芦花鸡中的表达特征,发现其在正常体型芦花鸡肝脏组织中高表达。（2）在鸡肝癌细胞系（LMH）和鸡成纤维细胞系（DF-1）中过表达circIDE后,细胞增殖明显,增殖标记基因表达量增加,表明circIDE对细胞增殖具有促进作用,初步表明circIDE具有生物学功能。circIDE对IDE mRNA在不同的细胞中作用结果相同。（3）circIDE的序列为IDE线性分子的Exon2-11构成,生物信息学分析表明其既没有mi RNA的结合位点,也没有开放阅读框。提示circIDE发挥其生物学功能的方式既不是通过mi RNA海绵机制,也不是通过编码氨基酸来实现的。本研究发现IDE基因能够转录出环状转录本circIDE,circIDE的表达具有时间、组织和品系差异性,同时我们发现circIDE可促进鸡LMH和DF-1增殖,表明其具有生物学功能。过表达circIDE后,IDE mRNA在不同的细胞中表现为上升趋势,暗示其在不同类型的细胞中影响细胞增殖的机制相同。本研究为后续深入挖掘circIDE促进细胞增殖的机制奠定了基础。
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