【摘 要】
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二氢杨梅素(DMY)存在于藤茶中,属二氢黄酮醇类化合物,具有优良的生理保健功能,特别是抗氧化活性,但因具有溶解度和稳定性差的特性,导致生物利用度较低。蛹虫草子实体多糖(CMP)已被证明是功能性食品和有潜力的天然补充剂,具有大分子量和复杂结构。本文在DMY和CMP的提取纯化、结构鉴定的基础上进行二者相互作用对功能特性影响的研究。提取藤茶中的二氢杨梅素:温度75℃,时间2 h,料液比1:30(g/m
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二氢杨梅素(DMY)存在于藤茶中,属二氢黄酮醇类化合物,具有优良的生理保健功能,特别是抗氧化活性,但因具有溶解度和稳定性差的特性,导致生物利用度较低。蛹虫草子实体多糖(CMP)已被证明是功能性食品和有潜力的天然补充剂,具有大分子量和复杂结构。本文在DMY和CMP的提取纯化、结构鉴定的基础上进行二者相互作用对功能特性影响的研究。提取藤茶中的二氢杨梅素:温度75℃,时间2 h,料液比1:30(g/m L),乙醇浓度75%,得到二氢杨梅素粗品。对二氢杨梅素粗品进行纯化:30倍丙酮回流30 min,1%活性炭吸附,每12 h结晶一次,反复结晶3次,得到纯化样品,得率为13.34%,纯度为95.96%。高效液相色谱法表明纯化后的样品为单一组份。通过紫外全波长扫描、红外光谱、核磁共振、质谱等进行结构鉴定,表明纯化样品为二氢杨梅素。提取蛹虫草子实体中的多糖:温度80℃,时间4 h,料水比1:30(g/m L),提取3次。经过醇沉、除蛋白、除色素、透析后得到蛹虫草子实体粗多糖。Sephadex G-200柱层析分离纯化后得到蛹虫草子实体纯多糖CMP。通过高效液相色谱法证实其为单一组分,重均分子量为3.3×10~3k Da。单糖组成结果表明CMP由D-Man、D-Glc、D-Gal组成,摩尔比为1.00:6.67:0.32。通过红外光谱、核磁共振、高碘酸氧化和Smith降解以及甲基化分析,其结构由(1→)-D-Glcp,(1→6)-D-Galp,(1→4)-D-Glcp,(1→3)-D-Glcp,(1→4)-β-D-Glcp和(1→3)-D-Manp组成,摩尔比为1.00:0.63:5.96:1.46:0.66:1.38。测定了CMP对DMY溶解性、稳定性的影响,从固态和液态两个方面探究及其作用机理,并测定抗氧化活性。对溶解度进行测定发现,DMY在水溶液中较于在饱和CMP溶液中的溶解度增加了3.23倍。通过恒温加速法测定稳定性,结果表明,加入CMP后,DMY的半衰期从5.49 h增长至7.32 h。相溶解度研究结果表明,DMY与CMP在水中以1:1的化学计量比形成AL型络合物。对固态络合物进行FT-IR、SEM及热重的表征发现,二者可能能够通过范德华力、氢键、静电力等非共价键发生相互作用。体外抗氧化试验结果显示,浓度均为0.5 mg/m L时,DMY对DPPH·、ABTS·+、O2-·和·OH自由基的抑制率分别为72.47%、99.91%、42.51%、61.23%;CMP的抑制率分别为16.32%、28.76%、28.72%和28.41%;络合物的抑制率分别为67.24%、99.89%、41.38%和35.25%。总体来说,在DMY含量大幅降低的情况下,络合物的抗氧化活性大多依然较好,甚至能够达到与DMY持平的效果。
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