【摘 要】
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蒲公英(Taraxacum mongolicun Hand.-Mazz.)是一种野生的药食同源的中药材,在民间存在许多以蒲公英为原料的中药复方和验方,在防病治病方面发挥了重要作用。随着对蒲公英化学成分和生物活性研究的不断深入,发现蒲公英含有酚酸类、黄酮类、萜类、甾醇类等多种活性成分,具有抗肿瘤、抗炎、抑菌和抗氧化等药理作用。近年来,国家大健康产品研发以及产业的快速发展,有关蒲公英酚酸类物质的生物活
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蒲公英(Taraxacum mongolicun Hand.-Mazz.)是一种野生的药食同源的中药材,在民间存在许多以蒲公英为原料的中药复方和验方,在防病治病方面发挥了重要作用。随着对蒲公英化学成分和生物活性研究的不断深入,发现蒲公英含有酚酸类、黄酮类、萜类、甾醇类等多种活性成分,具有抗肿瘤、抗炎、抑菌和抗氧化等药理作用。近年来,国家大健康产品研发以及产业的快速发展,有关蒲公英酚酸类物质的生物活性已成为研究热点,但对于蒲公英酚酸的抗肿瘤活性研究较少。酚酸类物质作为次生代谢产物,其提取方法多以溶剂提取法、超声波辅助提取法、酶解法等为主,但这些方法存在着提取效率低、提取成本高和提取时间长等缺点,制约了酚酸类物质作为具有药理作用的进一步研发与应用。为此,本研究采用超声微波协同法提取蒲公英酚酸类物质,并对其提取工艺进行优化,分析蒲公英酚酸提取物组组成成分,研究蒲公英酚酸类物质的抗肿瘤活性。主要研究结果如下:1.蒲公英酚酸超声微波协同提取的工艺优化:首先通过单因素实验对蒲公英酚酸进行提取工艺优化,结果显示,最优条件为:乙醇浓度50%、料液比1:30 g/m L、提取时间20min、超声波功率250 W和微波功率250 W。经差异显著性分析后,利用响应面进一步优化,结合实际可操作性,最优解为:乙醇浓度50%、提取时间20 min、超声功率257 W、微波功率256 W。采用最优提取条件提取蒲公英酚酸得率达27.03 mg/g。采用XDA-8大孔树脂对蒲公英酚酸粗提物进行富集纯化,纯化后得率达56.37%。2.蒲公英酚酸提取物的组成成分分析:采用傅里叶红外光谱、液质联用的现代分析方法对蒲公英酚酸提取物进行组成成分分析。结果表明,蒲公英酚酸提取物含有7种酚酸类物质,这些化合物如下:3-O-咖啡酰基奎尼酸,咖啡酸,绿原酸,对香豆酸,丁香酸,原儿茶酸,阿魏酸。这些酚酸类化合物均具有酚羟基、羧基和苯环等酚酸类物质的特征官能团。3.蒲公英酚酸的抗肿瘤活性研究:通过MTT法、Hoechst 33342染色、流式细胞计数和细胞划痕实验,研究蒲公英酚酸对肿瘤细胞增殖抑制、细胞凋亡和细胞迁移能力等药理作用。结果表明,蒲公英酚酸能够抑制胃癌MGC 803和肝癌Hep G 2细胞增殖,呈浓度和时间依赖性,当酚酸浓度为300μg/m L时,胃癌MGC 803细胞的增殖抑制率达54.30%;同时,蒲公英酚酸还可促进胃癌MGC 803和肝癌Hep G 2细胞的凋亡,酚酸浓度由100μg/m L提高至300μg/m L时,胃癌MGC 803细胞凋亡率从36.23%提高至74.00%,高度呈现浓度依赖性。同时,蒲公英酚酸还可抑制肿瘤细胞的迁移,且对胃癌MGC 803的迁移抑制效果明显。
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