作为三环类抗抑郁药（Tricyclic antidepressants,TCAs）的典型代表,阿米替林（Amitriptyline,AMI）具有良好的抗抑郁效果,因此也成为世界范围内使用最为广泛的精神类药物之一。阿米替林的活性成分可经多种方式持续释放到环境中,最终汇聚到各类水体中,其残留浓度通常在ng/L到μg/L之间。AMI脂溶性较高,可以在生物体血浆、脑、和肝脏中富集,并通过食物链产生生物放大效应,进而对水体中的多种非靶标生物产生不利影响。因此,准确地评估以AMI为代表的三环类药物残留对各类水生生物的影响及其潜在的生态风险,对于水体生态系统的精准保护具有重要的意义。但是,目前关于AMI对硬骨鱼类毒性效应的作用机制仍不明确,亟待开展针对性的研究。本研究选取AMI作为目标污染物,以模式生物斑马鱼（Danio rerio）作为实验对象,通过短期暴露与恢复实验、长期暴露实验和代际暴露实验,分析不同AMI暴露条件下斑马鱼在行为、生理、生化和分子等层面的应答差异,揭示AMI暴露对斑马鱼的神经行为毒性效应,并进一步阐明其分子机制。主要研究内容如下:（1）短期暴露与恢复实验:建立AMI对斑马鱼成鱼（仅雌鱼,四月龄）的暴露与恢复模型,将斑马鱼暴露于AMI（0、2.5、40μg/L）中进行为期7天的染毒实验（E7）,后转入洁净的脱氯水（无AMI）中恢复21天（R21）。在E7和R21两个时间点上研究了斑马鱼行为、脑神经递质含量和脑转录组的变化。结果表明,AMI暴露可导致持续性的活动减退（2.5和40μg/L）和社交行为异常（40μg/L）。AMI暴露对大脑5-HT、5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）、NE和乙酰胆碱（ACH）等神经递质的浓度产生持续性影响,并且这些影响与运动活性和社交行为的改变存在显著相关性。转录组学分析显示脑中涉及昼夜节律、聚糖生物合成和代谢以及轴突引导的通路持续失调。其中12个差异表达基因（Differentially expressed genes,DEGs）被预测为响应AMI暴露的关键驱动基因,它们的差异表达可能直接导致相关分子网络的变化。此外,脑5-HT的上调是AMI短期暴露导致斑马鱼持续性异常响应的中枢调节因素。（2）长期暴露实验及雌雄差异:建立AMI对斑马鱼成鱼（雄鱼与雌鱼,四月龄）的长期暴露模型,将斑马鱼暴露于AMI（0、8.0μg/L）中进行为期21天染毒实验,研究不同性别的斑马鱼的行为、脑神经递质含量和脑转录组的变化。结果显示,AMI对不同性别斑马鱼的运动存在相似的变化,均表现出暴露组中斑马鱼运动活动减退、社交活动降低。同时,暴露后斑马鱼的求偶行为也为显著减少。AMI的暴露均可使不同性别的斑马鱼神经递质（5-HT、DA、NE、ACH）水平产生一定的升高。与雌鱼相比,雄鱼的行为学与脑内神经递质水平变化对AMI暴露更为敏感。斑马鱼的运动活性与求偶行为的变化或由神经递质的水平改变引起。转录组学分析显示,AMI暴露后雄鱼较雌鱼多71个DEGs。雄鱼与雌鱼暴露组中均检测关键驱动基因各10个,均与昼夜节律相关。仅于雄鱼暴露组中检出的nr1d1、nr1d2b基因表达量显著下调。上述两个基因所编码蛋白对脑组织中DA的浓度起到调控作用,它们的差异表达可能是引起斑马鱼行为学响应性别差异的重要因素之一。（3）母本暴露实验及代际传递:建立AMI对斑马鱼成鱼（四月龄）代际传递模型,将F0代（雌鱼:雄鱼=1:1）暴露于AMI（0、0.8、8.0μg/L）中,于第21天进行产卵实验并收集受精卵（F1代）进行孵化和饲养。将各处理组的受精卵分别移入E3胚胎培养液（无AMI）中培养至第5天（5 day post fertilization,dpf）,定期观察胚胎的生长发育情况,并于5 dpf研究仔鱼的行为与转录组的变化。结果表明,AMI暴露可显著降低F0代产生健康受精卵的能力,并引起F1代仔鱼的心率失调。行为学结果显示,AMI的母本暴露引起F1代仔鱼的运动活性降低并倾向于在中心观察区活动,表明其焦虑情绪较低、敏感度下降。F1仔鱼的转录组分析表明12个DEGs可能作为关键驱动基因影响内质网中的蛋白质加工、胰岛素抵抗、神经元发育等通路,表明F1仔鱼可能出现了内质网应激,多种代谢过程异常,及神经系统损伤。上述成果为评估AMI药物残留对水生生物的毒性影响及其生态风险提供科学依据。