鱼类能经济地提供优质蛋白,具有显著的社会经济价值。如何获得高数量、高质量鱼卵已经成为水产养殖业的主要目标之一。Foxo3是Fox O家族的成员,在细胞周期、DNA损伤修复、细胞凋亡、氧化应激和能量代谢中起重要作用。在卵子发生过程中,卵母细胞的基因表达会发生动态变化,这些变化受生殖系和胞体中协调良好的转录因子的调控。Foxo3作为生殖细胞和体细胞表达的转录调节因子,在生殖发育中起关键作用。在哺乳动物中研究发现,Foxo3可以诱导卵母细胞和颗粒细胞凋亡,抑制原始卵泡的激活,调节卵泡的生长发育。在鱼类卵巢中Foxo3相关研究较少,因此本研究以稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）为实验动物,对由于真骨鱼类特异的基因组复制产生的两个foxo3（foxo3a和foxo3b）基因进行了克隆,并对其表达和功能进行初步分析,研究结果如下:1.全长cDNA克隆:利用RACE技术克隆了foxo3a和foxo3b全长cDNA序列。foxo3a基因全长cDNA序列为2562-bp,包括242-bp的5’端非编码区、367-bp的3’端非编码区、1953-bp的开放阅读框,编码650个氨基酸;foxo3b基因全长cDNA序列为2804-bp,包括470-bp的5’端非编码区、375-bp的3’端非编码区、1959-bp的开放阅读框,编码652个氨基酸。通过序列对比,Foxo3a氨基酸序列间相似性为85.90%,Foxo3b氨基酸序列间相似性为85.62%,均含有Forkhead（FH,叉头结构域）、FOXO-TAD（FOXO蛋白特有TAD结构域）、FOXO＿KIX＿bdg（叉头盒O,CR2的KIX结合域）结构域。系统发生分析和共线性分析发现,稀有鮈鲫foxo3b基因与四足类foxo3基因的进化关系更近。2.表达分析:通过qRT-PCR发现,foxo3a基因只在脑和卵巢中表达,在其它组织中不表达;foxo3b基因在所检测的组织中均有表达,在脑和卵巢中表达较高。说明foxo3b基因与四足类Foxo3基因扮演的功能角色更为相近,而foxo3a基因可能只是分担了生殖轴上的功能。foxo3a和foxo3b基因在卵巢中的表达均高于精巢,表明其与鱼类卵巢的发育密切相关。原位杂交结果发现,foxo3a和foxo3b基因定位于卵巢II、III、IV时相的生殖细胞和滤泡细胞。由此可见,稀有鮈鲫foxo3a和foxo3b基因在卵母细胞和滤泡细胞发育中具有一定功能。3.以mTOR通路抑制剂雷帕霉素处理卵巢:采用mTOR通路抑制剂雷帕霉素处理3月龄雌性稀有鮈鲫个体至4月龄,正常饲养至5月龄,测定不同阶段性腺指数（GSI）和卵巢发育情况,Real-time PCR检测卵子发生相关基因的表达情况。处理发现3、4、5月龄对照组和3月龄处理组卵巢具有IV时相卵母细胞,4月龄处理组只具有I、II时相卵母细胞,5月龄处理组卵巢中观察到III时相卵母细胞;处理组GSI显著低于对照组;相关基因的表达情况显示,处理组中foxl2、fshr、cyp11a1、cyp19a1a和bmp15表达显著低于对照组,figlα在处理组中表达显著高于对照组。由此可见,雷帕霉素处理影响了卵巢中foxo3a基因的表达,对foxo3b基因的表达无显著影响;雷帕霉素处理导致稀有鮈鲫卵母细胞发育停滞在II时相,雷帕霉素处理对类固醇发生通路具有一定抑制作用,从而影响卵母细胞发育。综上所述,本研究成功克隆了稀有鮈鲫卵巢foxo3a和foxo3b基因全长cDNA序列,结合mTOR通路抑制剂雷帕霉素处理试验,对这两个复制基因的初步表达和功能进行分析,foxo3a和foxo3b在稀有鮈鲫卵子发生中发挥一定的作用。本研究可以为经济鱼类高效人工繁殖提供参考。