【摘 要】
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目的利用模式动物斑马鱼来研究氚水和木黄酮联合暴露对生长发育的影响及其分子机制。方法1.斑马鱼胚胎随机分为4组,分别为用空白对照组（单纯E3培养基）、氚水暴露组（培养基中含终浓度为3.7*102Bq/mL的氚水）、木黄酮暴露组（培养基中含终浓度为1.4mg/L的木黄酮）以及氚水和木黄酮联合暴露组（3.7*102Bq/mL的氚水+1.4mg/L的木黄酮）,观察胚胎以及幼鱼的生存率、孵化率、畸形率以及心
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目的利用模式动物斑马鱼来研究氚水和木黄酮联合暴露对生长发育的影响及其分子机制。方法1.斑马鱼胚胎随机分为4组,分别为用空白对照组（单纯E3培养基）、氚水暴露组（培养基中含终浓度为3.7*102Bq/mL的氚水）、木黄酮暴露组（培养基中含终浓度为1.4mg/L的木黄酮）以及氚水和木黄酮联合暴露组（3.7*102Bq/mL的氚水+1.4mg/L的木黄酮）,观察胚胎以及幼鱼的生存率、孵化率、畸形率以及心率等指标。2.收集受精后96小时（96 hpf）的对照组和联合暴露组斑马鱼的幼鱼样本,进行转录组组测序,生物信息学分析测序结果,筛选出联合暴露诱发的主要差异基因,并通过RT-qPCR技术对其进行验证。3.通过CRISPR/Cas9技术敲除cyp19a1b基因,观察cyp19a1b-/-斑马鱼在染毒过程中的生长发育情况,验证cyp19a1b对斑马鱼氚水和木黄酮联合暴露的调控作用。结果1.氚水和木黄酮联合染毒后斑马鱼在死亡率、畸形率升高、孵化率降低;尾部自发运动增加、身长以及心率出现了降低,心房与心室之间的距离变宽。2.转录组的测序结果显示,对照组和联合染毒组共有1061个差异表达基因,其中上调的基因745个,下调的基因316个。差异基因主要富集在P53、细胞色素P450、固醇类合成等信号通路。3.Cyp19a1b在斑马鱼氚水和木黄酮联合染毒过程中参与生长发育的调控。结论氚水和木黄酮联合暴露会增加木黄酮对斑马鱼的毒性,主要表现在死亡率、畸形率的升高以及心脏形态畸形和心率的异常。Cyp19a1b基因在斑马鱼的生长发育过程中发挥着重要的作用,对其进行干预能够减弱联合暴露的毒性。
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