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等边浅蛤(Gomphina aequilatera)属于广温广盐性种类，在我国南北海岸均有分布，是一种栖息于潮间带中、下潮区泥砂质底营底栖生活的经济贝类。等边浅蛤一般以带壳鲜销为主，少数加工为罐头制品和干制品。近年来等边浅蛤虾塘和滩涂养殖规模不断扩大，产量逐年增加，具有较高的营养价值和经济价值市场，因而加工及其高值化综合利用是蛤类资源开发利用的重要研究课题。
目前，越来越多的人关注如何提高人群机体免疫力。食源性免疫活性肽无毒、低敏、安全性高且可以调节人和动物机体免疫能力，在人类营养健康和疾病调节中发挥着不可替代的作用。而海洋类动物由于生长环境特殊，体内的氨基酸结构与陆地动物不同，其分离出的活性肽带正电荷，因此与显负电性的细胞因子受体大量结合，增强机体免疫力。海洋贝类中马氏珠母贝、青蛤、波纹巴非蛤、文蛤、牡蛎、扇贝、贻贝等均被分离出免疫活性肽，但是对于等边浅蛤是否具有免疫活性还未见报道。本研究以等边浅蛤(Gomphina aequilatera)为原料，首先，通过分析其基本营养特性及蛋白质的理化性质；而后选择合适酶进行酶解，采用体外活性和体内实验评价其免疫活性；并采用超滤、凝胶色谱等对其有效活性成分进行分离纯化，以期为其高值化开发利用提供基础理论依据和途径。主要研究内容及结果如下：
(1)通过测定等边浅蛤的基本营养成分和蛋白质的理化性质。其基本营养成分含量(干基)结果如下：粗蛋白含量(53. 80%)，粗脂肪含量(5.88%)，灰分(18.37%)，总糖(17.48%)。因此，等边浅蛤是一种高蛋白低脂肪的水产品。其水溶性蛋白含量最高，占原料总蛋白的59.97%。等边浅蛤组成蛋白氨基酸齐全，且与免疫功能有关的碱性氨基酸和疏水氨基酸均超过总氨基酸的50%。SDS-PAGE电泳结果显示，上述3类蛋白质组分主要分布在29.0kDa-200kDa之间；其中水溶性蛋白条带较多、分布广泛；盐溶性蛋白组分分子量大多介于66.4kDa-200kDa和29.0kDa-44.3kDa之间；不溶性蛋白组分在200kDa，120kDa，44kDa，35kDa有明显蛋白条带。差示扫描量热法结果显示：等边浅蛤的水溶性蛋白组分的变性温度为69.1℃、盐溶性的为61.7℃、不溶性为57.4℃，表明水溶性蛋白组分具有较好的热稳定性。
(1)通过测定等边浅蛤的基本营养成分和蛋白质的理化性质。其基本营养成分含量(干基)结果如下：粗蛋白含量(53. 80%)，粗脂肪含量(5.88%)，灰分(18.37%)，总糖(17.48%)。因此，等边浅蛤是一种高蛋白低脂肪的水产品。其水溶性蛋白含量最高，占原料总蛋白的59.97%。等边浅蛤组成蛋白氨基酸齐全，且与免疫功能有关的碱性氨基酸和疏水氨基酸均超过总氨基酸的50%。SDS-PAGE电泳结果显示，上述3类蛋白质组分主要分布在29.0kDa-200kDa之间；其中水溶性蛋白条带较多、分布广泛；盐溶性蛋白组分分子量大多介于66.4kDa-200kDa和29.0kDa-44.3kDa之间；不溶性蛋白组分在200kDa，120kDa，44kDa，35kDa有明显蛋白条带。差示扫描量热法结果显示：等边浅蛤的水溶性蛋白组分的变性温度为69.1℃、盐溶性的为61.7℃、不溶性为57.4℃，表明水溶性蛋白组分具有较好的热稳定性。
(2)以水解度(DH)和蛋白回收率为评价指标，选用中性蛋白酶，木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解等边浅蛤，研究其酶解产物对DPPH自由基和ABTS自由基的清除效果及其对小鼠RAW264.7细胞的增殖率和吞噬中性红能力的影响。结果显示：相同酶解条件下，木瓜蛋白酶组DH最高，而中性蛋白酶组蛋白回收率最大；中性蛋白酶组和胰蛋白酶组均对DPPH和ABTS自由基的清除效果最好，其清除率分别为56.6%和57.9%、98.9%和100.2%；中性蛋白酶组对小鼠RAW264.7细胞相对增殖率和吞噬中性红能力的影响效果最佳(P＜0.05)，其中细胞相对增殖率为115.2%。最后确定中性蛋白酶为下一步实验用酶。
(3)利用超滤法对等边浅蛤肉酶解产物进行分离，得到＞3kDa超滤组分和＜3kDa超滤组分，并对其免疫活性进行评价。体外免疫评价结果显示，在质量浓度为1000μg/mL时，＜3kDa超滤组分清除DPPH和ABTS自由基，促进巨噬细胞增殖和增强其吞噬作用效果显著(P＜0.05)。体内免疫活性评价结果显示，其酶解产物及其超滤组分均能提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和抑制丙二醛(MDA)含量。其中＜3kDa超滤组分高剂量组能有效提高GSH-Px活力。且＜3kDa超滤组分能增强小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、自然杀伤细胞(NK)活性、IgG和IgA含量，具有增强免疫活性。综上，等边浅蛤酶解产物＜3kDa超滤组分具有免疫调节增强作用。
(4)通过SephadexG25凝胶柱对＜3kDa超滤组分进行分离纯化，得出5个组分(F1-F5)，以细胞增殖、吞噬中性红和NO生成实验评价各组分的免疫活性。结果表明，F3分离组分能显著提高细胞相对增殖率和生成NO量，而F1、F2、F3分离组分能显著提高细胞的吞噬能力。综合考虑确定F3组分的免疫活性最强。
目前，越来越多的人关注如何提高人群机体免疫力。食源性免疫活性肽无毒、低敏、安全性高且可以调节人和动物机体免疫能力，在人类营养健康和疾病调节中发挥着不可替代的作用。而海洋类动物由于生长环境特殊，体内的氨基酸结构与陆地动物不同，其分离出的活性肽带正电荷，因此与显负电性的细胞因子受体大量结合，增强机体免疫力。海洋贝类中马氏珠母贝、青蛤、波纹巴非蛤、文蛤、牡蛎、扇贝、贻贝等均被分离出免疫活性肽，但是对于等边浅蛤是否具有免疫活性还未见报道。本研究以等边浅蛤(Gomphina aequilatera)为原料，首先，通过分析其基本营养特性及蛋白质的理化性质；而后选择合适酶进行酶解，采用体外活性和体内实验评价其免疫活性；并采用超滤、凝胶色谱等对其有效活性成分进行分离纯化，以期为其高值化开发利用提供基础理论依据和途径。主要研究内容及结果如下：
(1)通过测定等边浅蛤的基本营养成分和蛋白质的理化性质。其基本营养成分含量(干基)结果如下：粗蛋白含量(53. 80%)，粗脂肪含量(5.88%)，灰分(18.37%)，总糖(17.48%)。因此，等边浅蛤是一种高蛋白低脂肪的水产品。其水溶性蛋白含量最高，占原料总蛋白的59.97%。等边浅蛤组成蛋白氨基酸齐全，且与免疫功能有关的碱性氨基酸和疏水氨基酸均超过总氨基酸的50%。SDS-PAGE电泳结果显示，上述3类蛋白质组分主要分布在29.0kDa-200kDa之间；其中水溶性蛋白条带较多、分布广泛；盐溶性蛋白组分分子量大多介于66.4kDa-200kDa和29.0kDa-44.3kDa之间；不溶性蛋白组分在200kDa，120kDa，44kDa，35kDa有明显蛋白条带。差示扫描量热法结果显示：等边浅蛤的水溶性蛋白组分的变性温度为69.1℃、盐溶性的为61.7℃、不溶性为57.4℃，表明水溶性蛋白组分具有较好的热稳定性。
(1)通过测定等边浅蛤的基本营养成分和蛋白质的理化性质。其基本营养成分含量(干基)结果如下：粗蛋白含量(53. 80%)，粗脂肪含量(5.88%)，灰分(18.37%)，总糖(17.48%)。因此，等边浅蛤是一种高蛋白低脂肪的水产品。其水溶性蛋白含量最高，占原料总蛋白的59.97%。等边浅蛤组成蛋白氨基酸齐全，且与免疫功能有关的碱性氨基酸和疏水氨基酸均超过总氨基酸的50%。SDS-PAGE电泳结果显示，上述3类蛋白质组分主要分布在29.0kDa-200kDa之间；其中水溶性蛋白条带较多、分布广泛；盐溶性蛋白组分分子量大多介于66.4kDa-200kDa和29.0kDa-44.3kDa之间；不溶性蛋白组分在200kDa，120kDa，44kDa，35kDa有明显蛋白条带。差示扫描量热法结果显示：等边浅蛤的水溶性蛋白组分的变性温度为69.1℃、盐溶性的为61.7℃、不溶性为57.4℃，表明水溶性蛋白组分具有较好的热稳定性。
(2)以水解度(DH)和蛋白回收率为评价指标，选用中性蛋白酶，木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解等边浅蛤，研究其酶解产物对DPPH自由基和ABTS自由基的清除效果及其对小鼠RAW264.7细胞的增殖率和吞噬中性红能力的影响。结果显示：相同酶解条件下，木瓜蛋白酶组DH最高，而中性蛋白酶组蛋白回收率最大；中性蛋白酶组和胰蛋白酶组均对DPPH和ABTS自由基的清除效果最好，其清除率分别为56.6%和57.9%、98.9%和100.2%；中性蛋白酶组对小鼠RAW264.7细胞相对增殖率和吞噬中性红能力的影响效果最佳(P＜0.05)，其中细胞相对增殖率为115.2%。最后确定中性蛋白酶为下一步实验用酶。
(3)利用超滤法对等边浅蛤肉酶解产物进行分离，得到＞3kDa超滤组分和＜3kDa超滤组分，并对其免疫活性进行评价。体外免疫评价结果显示，在质量浓度为1000μg/mL时，＜3kDa超滤组分清除DPPH和ABTS自由基，促进巨噬细胞增殖和增强其吞噬作用效果显著(P＜0.05)。体内免疫活性评价结果显示，其酶解产物及其超滤组分均能提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和抑制丙二醛(MDA)含量。其中＜3kDa超滤组分高剂量组能有效提高GSH-Px活力。且＜3kDa超滤组分能增强小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、自然杀伤细胞(NK)活性、IgG和IgA含量，具有增强免疫活性。综上，等边浅蛤酶解产物＜3kDa超滤组分具有免疫调节增强作用。
(4)通过SephadexG25凝胶柱对＜3kDa超滤组分进行分离纯化，得出5个组分(F1-F5)，以细胞增殖、吞噬中性红和NO生成实验评价各组分的免疫活性。结果表明，F3分离组分能显著提高细胞相对增殖率和生成NO量，而F1、F2、F3分离组分能显著提高细胞的吞噬能力。综合考虑确定F3组分的免疫活性最强。