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链格孢霉毒素是链格孢霉菌产生的有毒代谢产物,包括交链孢菌酮酸(TeA)、交链孢酚(AOH)、交链孢酚单甲醚(AME)、交链孢烯(ALT)和腾毒素(TEN)等。这类毒素广泛存在于土壤、空气、水等环境介质以及谷物、油籽、果蔬等食品介质中。食品中链格孢霉毒素的污染是当前备受关注的公共卫生问题之一,流行病学和毒理学研究表明链格孢霉毒素可导致人和动物急性食物中毒,并具有致过敏、致畸、致突变和致癌等风险,欧洲食品安全局(EFSA)制定了AOH、AME、TeA和TEN的毒理学关注阈值(TTC),分别是2.5、2.5、1500和1500ng/kgbodyweight。
总膳食研究(TDS)是目前国际上公认的评价一个国家或地区大规模人群膳食中化学污染物和营养素摄入量的通用、最好的方法。本论文在开发多类膳食样本链格孢霉素检测方法的基础上,基于中国人群总膳食研究的样本,开展中国居民膳食中链格孢霉毒素暴露水平研究,为制定食品中链格孢霉毒素限量标准提供科学依据,同时初步开展了链格孢霉毒素人群内暴露水平研究。具体如下:
(1)建立12类总膳食样品中6种链格孢霉毒素液相色谱-串联质谱痕量分析方法,不同基质方法回收率71.7%?114.0%,检测限0.0003?0.033μg/kg或μg/L,精密度0.3%?16.0%。基于建立的分析方法,开展了中国居民第五次和第六次总膳食样品中6种链格孢霉毒素的污染水平研究。研究结果表明,我国总膳食中存在链格孢霉毒素的普遍污染,总检出率为79.2%。其中,谷物和肉类检出率最高(100%),其次是蔬菜(97.7%),糖、薯类和蛋类(95.5%),豆类和水产(93.2%),酒类(90.9%),乳类(65.9%),水果(54.5%)以及水及饮料(52.3%)。从平均污染水平来看,水果类中TeA、AOH、ALT和TEN平均污染水平最高分别是21.95μg/kg、1.39μg/kg、0.70μg/kg和0.18μg/kg,薯类中ATX-Ⅰ平均污染水平最高(1.76μg/kg),糖类中AME平均污染水平最高(2.01μg/kg)。从对中国居民总膳食暴露水平的贡献来看,谷物贡献最高。尤其需要注意的是60%以上的省份AOH、AME的污染暴露水平已经超过了欧盟制定的TTC值;北京市和宁夏回族自治区在第五次中国总膳食TeA的暴露水平超过TTC值。
(2)采用液液萃取-干冰速冻转移浓缩的方法建立了尿液中5种链格孢霉毒素的痕量快速分析方法,方法检测限TeA、ALT、AOH、TEN和AME的LOQ分别为0.05、0.06、0.06、0.005和0.001ng/mL。回收率92.7%至103.2%,日内日间精密度小于10.5%。基于建立的分析方法研究了北京人群的链格孢霉毒素的内暴露水平,2250个样本中96.2%人检出链格孢霉毒素,其中AME检出率最高(96.2%),其次是TeA(74.3%)。AME的内暴露平均值为12.5ng/kgb.w.,是TTC值的5倍,TeA的内暴露平均值为38.2ng/kgb.w.,低于TTC。
(3)采用液相色谱-串联四极杆质谱建立了樱桃及樱桃制品中五种链格孢霉毒素痕量分析方法,方法灵敏度(方法的LOD和LOQ分别在0.001?0.020μg/kg和0.002?0.066μg/kg之间)高出文献报道的检测方法2~3个数量级。基于建立的分析方法开展了北京市市售的樱桃及樱桃制品污染水平研究,超过50%的样品中检出链格孢霉毒素,TeA最高检测含量为236.58μg/kg。利用网络问卷调查初步获得北京市樱桃消费数据,初步评估了樱桃消费摄入链格孢霉毒素风险,发现部分高消费量人群AME摄入水平有超过TTC值风险。
总膳食研究(TDS)是目前国际上公认的评价一个国家或地区大规模人群膳食中化学污染物和营养素摄入量的通用、最好的方法。本论文在开发多类膳食样本链格孢霉素检测方法的基础上,基于中国人群总膳食研究的样本,开展中国居民膳食中链格孢霉毒素暴露水平研究,为制定食品中链格孢霉毒素限量标准提供科学依据,同时初步开展了链格孢霉毒素人群内暴露水平研究。具体如下:
(1)建立12类总膳食样品中6种链格孢霉毒素液相色谱-串联质谱痕量分析方法,不同基质方法回收率71.7%?114.0%,检测限0.0003?0.033μg/kg或μg/L,精密度0.3%?16.0%。基于建立的分析方法,开展了中国居民第五次和第六次总膳食样品中6种链格孢霉毒素的污染水平研究。研究结果表明,我国总膳食中存在链格孢霉毒素的普遍污染,总检出率为79.2%。其中,谷物和肉类检出率最高(100%),其次是蔬菜(97.7%),糖、薯类和蛋类(95.5%),豆类和水产(93.2%),酒类(90.9%),乳类(65.9%),水果(54.5%)以及水及饮料(52.3%)。从平均污染水平来看,水果类中TeA、AOH、ALT和TEN平均污染水平最高分别是21.95μg/kg、1.39μg/kg、0.70μg/kg和0.18μg/kg,薯类中ATX-Ⅰ平均污染水平最高(1.76μg/kg),糖类中AME平均污染水平最高(2.01μg/kg)。从对中国居民总膳食暴露水平的贡献来看,谷物贡献最高。尤其需要注意的是60%以上的省份AOH、AME的污染暴露水平已经超过了欧盟制定的TTC值;北京市和宁夏回族自治区在第五次中国总膳食TeA的暴露水平超过TTC值。
(2)采用液液萃取-干冰速冻转移浓缩的方法建立了尿液中5种链格孢霉毒素的痕量快速分析方法,方法检测限TeA、ALT、AOH、TEN和AME的LOQ分别为0.05、0.06、0.06、0.005和0.001ng/mL。回收率92.7%至103.2%,日内日间精密度小于10.5%。基于建立的分析方法研究了北京人群的链格孢霉毒素的内暴露水平,2250个样本中96.2%人检出链格孢霉毒素,其中AME检出率最高(96.2%),其次是TeA(74.3%)。AME的内暴露平均值为12.5ng/kgb.w.,是TTC值的5倍,TeA的内暴露平均值为38.2ng/kgb.w.,低于TTC。
(3)采用液相色谱-串联四极杆质谱建立了樱桃及樱桃制品中五种链格孢霉毒素痕量分析方法,方法灵敏度(方法的LOD和LOQ分别在0.001?0.020μg/kg和0.002?0.066μg/kg之间)高出文献报道的检测方法2~3个数量级。基于建立的分析方法开展了北京市市售的樱桃及樱桃制品污染水平研究,超过50%的样品中检出链格孢霉毒素,TeA最高检测含量为236.58μg/kg。利用网络问卷调查初步获得北京市樱桃消费数据,初步评估了樱桃消费摄入链格孢霉毒素风险,发现部分高消费量人群AME摄入水平有超过TTC值风险。