氧化反应在许多生物体中是一种重要的生物进程，自由基作为氧化反应的产物，非常不稳定，可能导致DNA或蛋白质损伤，进而引发多种疾病，包括癌症，阿尔兹海默氏症以及其他神经性疾病。尽管合成的抗氧化物具有良好的抗氧化活性，但因其潜在的毒性和副作用，消费者对这些抗氧化物的抵抗越来越强，因此，从自然资源中开发抗氧化物成为新的研究热点。本实验采用酶解法制备菲律宾蛤仔酶解肽，酶解工艺通过正交试验方案进行优化，以最佳酶解条件制备酶解粗提物，粗提物经过分离纯化，氨基酸序列分析，结构表征分析等得到酶解寡肽纯化物；从体外和小鼠体内实验两方面对菲律宾蛤仔酶解寡肽的抗氧化活性进行研究。具体有如下几个部分。第一部分，菲律宾蛤仔酶解寡肽的制备首先将菲律宾蛤仔肌肉组织匀浆，利用胰蛋白酶酶解，采用正交实验设计，以DPPH清除力为指标，对活性肽的酶解制备工艺进行优化，得出最佳酶解条件为物料比1:2，加酶量2000U/g，pH为8，酶解温度为40℃，酶解时间12h。在此酶解条件下制备酶解物，利用超滤法将酶解物按分子量大小分成四个组分，收集抗氧化活性最强组分，浓缩后冷冻干燥，干燥物经G-25凝胶分离得到六个洗脱峰，收集抗氧化活性最高的峰，浓缩、冷冻干燥后经反相高效液相梯度洗脱进一步分离得到三个洗脱峰，选取最强抗氧化活性组分收集，高效液相检测得出该提取物为单一组分，氨基酸序列分析得其序列为Gly-Asp-Gln-Gln-Lys，分子量为575.45Da。第二部分，体外研究菲律宾蛤仔酶解寡肽抗氧化活性1、采用分光光度法测定寡肽对2,2′-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基、超氧阴离子（O2-·）、羟自由基（·OH）、DPPH自由基的清除能力，还原力和寡肽的金属离子螯合能力，结果发现菲律宾蛤仔酶解寡肽具有较显著的ABTS自由基（半数有效浓度（EC50）0.204g.L-1）、羟自由基（EC500.815g.L-1）、超氧阴离子自由基（EC500.066g.L-1）清除能力、还原力和金属离子螯合能力（EC501.554g.L-1）。2、琼脂糖凝胶电泳检测寡肽对羟自由基诱导的DNA损伤的保护作用。结果显示，与空白组（Blank）相比，对照组（Control）中超螺旋结构的DNA几乎完全消失并转化为开环结构，而加样组（1.25mg/mL,2.5mg/mL和5mg/mL）大部分DNA仍以超螺旋结构存在，小部分DNA被损伤形成开环结构DNA。说明寡肽对羟自由基诱导的DNA损伤显示出有效地保护作用，并且保护作用随浓度的升高而增强。3、四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测寡肽对肿瘤细胞DU-145和人体正常前列腺细胞RWPE-1的增殖抑制效应，结果发现，寡肽对前列腺癌DU-145细胞具有明显的增殖抑制作用（IC505.202mg/mL），并呈良好的量效关系。且人体正常前列腺细胞RWPE-1细胞毒性检测结果表明，寡肽对RWPE-1细胞无增殖抑制作用。第三部分，菲律宾蛤仔酶解寡肽体内抗氧化活性研究ICR雄性小鼠随机分成四组，分别灌服高、中、低剂量寡肽和生理盐水。连续给药30d后，心脏采血及组织取样，用试剂盒测定小鼠血清、脑、肝脏组织中超氧化歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力和丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量。结果显示，菲律宾蛤仔酶解寡肽可有效提高小鼠体内SOD和GSH-Px活力，并降低MDA含量，表明寡肽具有小鼠体内抗氧化活性。