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目的:探索肺癌原代细胞培养的方法,并检测肺癌原代细胞代谢过程中产生的挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs),筛选肺癌特征性的呼吸气体标记物,为呼吸气体诊断肺癌提供细胞水平的依据。方法:取邵逸夫医院2008年6月至2008年12月因“肺部肿物”行肺叶切除术的手术标本20例,每一例中取肿块组织作为实验组,距离肿块＞10cm的周边肺叶组织作为正常对照组,分别进行原代细胞培养。当培养瓶底见50%以上贴壁细胞生长后,利用固相微萃取--气相色谱质谱联用(solid-phase microextraction and gas chromatography-massspectroscopy,SPME-GCMS)技术,检测各个培养瓶顶空气体中的VOCs。结果:因“肺部肿物”行肺叶切除术的手术标本共20例,其中鳞癌9例,腺癌7例(包括3例腺癌合并细支气管肺泡癌),鳞腺癌(或腺鳞癌)2例,肺部良性病变2例(1例为慢性化脓性炎伴机化性肺炎,1例为支气管囊肿伴真菌感染)。采用组织块原代细胞培养方法,在组织块入温箱常规培养之前,事先翻转培养瓶放置30分钟,组织块贴壁良好;组织块经剪切后直接接种培养,一般经过24-48小时后即有贴壁细胞沿着组织块边缘生长,20例标本平均培养天数为11.75天,腺癌平均培养天数为10.1天(71天/7例),鳞癌平均培养天数为14.1天(127天/9例),两者有统计学差异(P＜0.05)。在质谱图上,出峰时间为17.78分钟和18.75分钟的物质在肺癌原代细胞培养液中的含量明显高于空白培养液中的含量,且其含量在不同类型的肺癌中有差异,由腺癌、腺癌合并细支气管肺泡癌、鳞癌依次递增;出峰时间为18.75分钟的物质在鳞癌的原代细胞培养液中含量明显较腺癌和腺癌合并细支气管肺泡癌高。经过质谱库相似度检索得出,出峰时间为17.78分钟和18.75分钟的物质分别为1-甲基-萘和正十五烷。结论:本实验采用组织块剪切后直接行原代细胞接种培养的方法简便易行,组织块贴壁率高,细胞活性大,培养成功率高。肺癌细胞代谢产生的1-甲基-萘和正十五烷,在肺腺癌和鳞癌原代细胞代谢中含量有差异,可能有助于肺癌的病理分型。