【摘 要】
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目的:通过动物实验探讨赖氨酸特异性去甲基化酶1（lysine-specific demethylase 1,LSD1）、叉头框转录因子F2（forkhead box F2,FOXF2）对结肠癌移植瘤生长及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达的影响。方法:1、构建慢病毒载体,通过细胞稳定转染技术,将空载体和FOXF2过表达慢病毒载体转染入人源结肠癌HCT116细胞中,设立阴性对照组（FOXF2
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目的:通过动物实验探讨赖氨酸特异性去甲基化酶1（lysine-specific demethylase 1,LSD1）、叉头框转录因子F2（forkhead box F2,FOXF2）对结肠癌移植瘤生长及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达的影响。方法:1、构建慢病毒载体,通过细胞稳定转染技术,将空载体和FOXF2过表达慢病毒载体转染入人源结肠癌HCT116细胞中,设立阴性对照组（FOXF2-EV）和FOXF2过表达组（FOXF2-OE）,未经任何处理的HCT116细胞设为空白对照组（Control）。2、通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,q RT-PCR）、免疫印迹法（Western blot,WB）验证转染效率,筛选稳转株。3、构建人结肠癌HCT116细胞裸鼠皮下移植瘤模型,使用LSD1抑制剂GSK2879552腹腔注射裸鼠,观察抑制LSD1、过表达FOXF2对裸鼠结肠癌移植瘤生长的影响。实验动物分组:阴性对照组、FOXF2过表达组、LSD1抑制组、FOXF2过表达+LSD1抑制组。4、通过Western blot检测移植瘤组织中LSD1、FOXF2、Wnt/β-catenin通路相关蛋白（β-catenin、c-myc）的表达,分析体内LSD1/FOXF2对Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达的影响。结果:1.构建FOXF2过表达慢病毒表达载体,并转染入结肠癌HCT116细胞中,转染效率:在HCT116细胞中FOXF2过表达率为569倍（P＜0.01）。2.与阴性对照组比较,FOXF2过表达组、LSD1抑制组移植瘤体积缩小、重量减轻（P＜0.05）。与FOXF2过表达组和LSD1抑制组比较,FOXF2过表达+LSD1抑制组移植瘤体积及重量明显减少,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。3.与阴性对照组比较,FOXF2过表达组、LSD1抑制组移植瘤组织中β-catenin、c-myc的蛋白表达降低（P＜0.05）。与FOXF2过表达组和LSD1抑制组比较,FOXF2过表达+LSD1抑制组移植瘤组织中β-catenin、c-myc的蛋白表达降低,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论:1.在裸鼠体内,抑制LSD1和过表达FOXF2均能抑制结肠癌生长,且抑制LSD1联合过表达FOXF2对结肠癌生长抑制作用更为显著。2.在裸鼠体内,抑制LSD1和过表达FOXF2均能抑制Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、c-myc的表达,且二者联合作用效果更为显著。
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