苦碟子,来源于菊科苦荬菜属植物抱茎苦荬菜Ixeris sonchifolia（Bunge）Hance.的全草,广泛分布于我国东北、华北、华南和西南地区,味苦、性寒,具有清热解毒、凉血、活血、排脓等功效,主治头痛,牙痛,咽喉肿痛,跌打伤痛,肠炎,阑尾炎,肺脓肿,疮痈肿毒等症状。临床上常用其水提物苦碟子注射液治疗脑梗塞、冠心病、肺源性心脏病、脑出血等心脑血管疾病,尤其对血瘀证兼热证患者疗效显著。苦碟子注射液临床疗效突出,但常伴随皮肤瘙痒、胸闷、皮疹、呕吐和心悸等不良反应发生,因此开发其口服制剂,阐明其发挥解毒、活血作用的药效物质和作用机制势在必行。且有研究表明,醇提物中活性成分含量更高,因此,本研究对苦碟子醇提物改善热毒血瘀证大鼠血液流变学的物质基础进行了研究。利用大孔树脂制备苦碟子醇提物不同洗脱部位,采用液质联用技术对不同洗脱部位的化学成分进行分析鉴定;将不同浓度醇洗脱部位干膏灌胃给予热毒血瘀证模型大鼠,从血液流变学的角度筛选苦碟子醇提物预防热毒血瘀证的活性部位,并对活性部位中的潜在活性成分进行含量测定;最后结合代谢组学技术研究苦碟子醇提物预防热毒血瘀证的潜在作用机制。本研究探索了“成分表征-活性筛选-质量控制-机制探讨”的研究模式,为中药药效物质基础研究提供了快捷、多维度的研究策略。研究具体内容如下:1.苦碟子醇提物不同洗脱部位化学成分分析采用70%乙醇加热回流提取,制备苦碟子醇提物。应用经优化的大孔树脂工艺条件进行各洗脱部位的分离:苦碟子醇提物最佳上样浓度为0.133 g/mL,上样量为0.5倍柱体积（BV）,水洗脱体积和不同浓度乙醇的洗脱体积均为4BV。苦碟子醇提物经大孔树脂洗脱分离,分别得到水洗脱部位、30%、50%、70%和95%乙醇洗脱部位。利用超高效液相色谱-线性离子阱-串联静电场轨道阱质谱（UPLC-LTQ-Orbitrap MS/MS）技术对苦碟子药材醇提物不同洗脱部位的化学成分进行分析鉴定,鉴定出包括核苷类、有机酸类、黄酮类、萜类、苯丙素类和其他类共82个化学成分,全面表征了苦碟子药材醇提物的化学物质基础。同时不同洗脱部位的化学成分存在如下差异:单咖啡酰酒石酸仅存在于水洗脱部位中,核苷类、黄酮苷类和有机酸类化合物主要存在于30%乙醇洗脱部位中,倍半萜内酯类化合物主要存在于50%乙醇洗脱部位中,三萜类和苯丙素类化合物主要存在于70%乙醇洗脱部位中,棕榈酸和亚油酸仅存在95%乙醇洗脱部位中。2.苦碟子醇提物不同洗脱部位对热毒血瘀证大鼠血液流变学的影响采用角叉菜胶（Carrageenin,Ca）和细菌脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）联合诱导的方式制备热毒血瘀证大鼠,分别灌胃给予苦碟子不同浓度醇洗脱部位,观察其对热毒血瘀证大鼠血液流变学的影响,筛选出苦碟子解毒、活血的活性部位为30%乙醇洗脱部位,经鉴定,主要为核苷类、有机酸类和黄酮苷类化合物,该部位可通过降低模型大鼠不同切变率下的全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白原和白细胞计数,升高红细胞沉降率和血小板计数,改善Ca和LPS联合所致的大鼠扎堆、少动、反应迟钝、精神萎靡、便溏和四肢无力等症状和黑尾现象。筛选了苦碟子解毒、活血作用的活性部位,为苦碟子药效物质基础的研究提供参考。3.苦碟子醇提物30%乙醇洗脱部位中四种活性成分的含量测定建立了高效液相色谱法同时测定苦碟子醇提物活性部位—3 0%乙醇洗脱部位中3-咖啡酰奎宁酸、咖啡酸、菊苣酸和木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷四种活性成分的含量,经线性、重复性、稳定性、精密度、回收率等方法学考察,各项均符合有关规定。对苦碟子醇提物30%乙醇洗脱部位中3-咖啡酰奎宁酸、咖啡酸、菊苣酸和木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量进行测定,四种活性成分含量的百分比分别为0.64%、0.08%、0.46%和0.43%。此四种活性成分可作为苦碟子醇提物30%乙醇洗脱部位质量控制的检测指标,为苦碟子醇提物的质量评价和药效物质基础研究提供了方法和依据。4.基于代谢组学探讨苦碟子醇提物活性部位对热毒血瘀证大鼠的保护机制研究基于UPLC-LTQ-Orbitrap MS/MS技术结合多元统计分析,分别对空白组、模型组和苦碟子醇提物30%乙醇洗脱部位给药组3个组别,进行苦碟子醇提物预防热毒血瘀证的代谢组学研究,共筛选得到与苦碟子醇提物30%乙醇洗脱部位预防热毒血瘀证有关的35个潜在生物标记物和9个相关代谢通路。苦碟子醇提物30%乙醇洗脱部位可能通过影响甘油磷脂代谢,鞘脂代谢,不饱和脂肪酸生物合成,亚油酸代谢,α-亚麻酸代谢,花生四烯酸代谢,脂肪酸降解,脂肪酸生物合成和嘌呤代谢等发挥作用。揭示了苦碟子醇提物预防热毒血瘀证发展的潜在作用机制。