目的:通过制备载anti-miR33双靶向超声造影剂（HA-PANBs）,实现以透明质酸（Hyaluronic acid,HA）为第一寻靶物质,适配子PM1为第二寻靶物质,miR-33的反寡义核苷酸（anti-miR-33）为治疗因子的靶向载体,利用分阶段寻靶策略实现对动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）斑块内功能受损巨噬细胞的高效、精准定位,并通过巨噬细胞对载体材料的吞噬作用,完成anti-miR-33的分阶段巨噬细胞胞内精准释放,为AS的防治提供新的精准到细胞水平的基础。方法:实验过程中使用薄膜水化法制备载体核心NBs（Nano Bubbles,NBs）。巯基马来酰胺法连接适配体PM1,静电吸附法及共价连接法连接anti-miR33,共价连接法连接HA构建以NBs为核心,PM1及HA为寻靶物质,anti-miR33为干预药物的双靶向造影剂;为了评价其一般理化性质,我们观察其形态、粒径及表面电位,同时监测其稳定性及体外造影能力并验证其对细胞的毒性作用。接下来通过在共培养小室（Transwell）上下室分别培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和巨噬细胞RAW264.7（MΦ）形成多细胞共培养体系（HUVEC/MΦ）,采用肿瘤坏死因子α（TNF-α）及氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）处理,使MΦ形成脂肪变性的泡沫细胞,并结合流式细胞术检测HUVEC中CD44的表达,光镜油红O染色观察,荧光酶标仪测定MΦ内的总胆固醇含量以及游离胆固醇来鉴定模型的构建情况并初步验证HA-PANBs的靶向能力。最后通过成功构建的体外受损内皮-巨噬细胞体外共培养体系评价巨噬细胞在不同时间段对不同浓度下HA-PANBs的吞噬效率、追踪anti-miR-33的细胞内分布及浓度,分析胞内溶解释放策略的可行性及最佳载药浓度和反应时间,精准定位靶细胞并量化anti-miR33释放过程:分阶段完成受损细胞的靶向识别后定量巨噬细胞吞噬anti-miR33的效率。结果:所制备的双靶向微泡超声造影剂HA-PANBs形态规则,稳定性好,电位粒径仪检测平均粒径为（1421.75±163.23）nm,平均表面电位为（-5.51±1.87）m V,PM1及anti-miR33在激光共聚焦显微镜下显示可与NBs均有效连接,PM1,anti-miR33,HA的结合率分别可达89.0±1.1%,65.02±5.0%,61.4±3.5%;最大结合量分别达到2ug,5ug,7ug/3x10~8个微泡。该双靶向微泡超声造影剂对细胞无明显毒性,且体外持续增强显影超过15min。采用10ng/m LTNF-α及60mg/Lox-LDL干预HUVEC/MΦ后MΦ内胆固醇酯比例达到50%以上,HUVEC显著表达CD44抗体,且油红O染色结果显示脂滴形成,双靶向微泡HA-PANBs靶向下层泡沫细胞的效果最佳,HA-PANBs大量黏附于泡沫细胞周围,与巨噬细胞比较靶向性具有统计学差异。anti-miR33在泡沫细胞中的转染率可达90.4±2.18%,HA-PANBs的转染率随着共孵育时间延长而增强,在24小时即可显著表达至84.9±1.8%,48小时荧光表达最佳可达91.5±1.9%。各组早期凋亡细胞百分比显示加入anti-miR33后早期凋亡细胞增多,HA-PANBs双靶向微泡组早期凋亡细胞率最高37.3±1.3%,可达到模型组5.1±1.7%的7倍。PCR结果显示HA-PANBs组可显著减少miR33的表达,与模型组比较具有统计学差异。结论:本研究成功制备了双靶向载anti-miR33微泡并优化了其最佳配比。HA-PANBs在体外与泡沫细胞具有明显的靶向黏附作用。HA-PANBs可用于超声分子影像为无创的动态监测AS过程中功能受损的泡沫细胞,减少miR33的表达。