随着我国禽养殖业规模的不断扩大,集约化程度提高,养殖场鸡粪处理问题日益凸显。鸡粪作为养鸡场（户）产生的重要生物质,合理的使用鸡粪资源能够带来养殖增收,而不当的处理导致其产生的恶臭气体会污染周边环境甚至危害人类健康,然而,国内关于鸡粪除臭菌剂及机理的研究还相对缺乏。本研究以新鲜鸡粪为试验材料,筛选具有脱臭效果的菌株,通过形态学观察和分子生物学方法对脱臭菌株进行鉴定,确定其分类地位,将得到的菌株进行复配,筛选出脱臭效果显著的复合型菌剂,研究复合菌剂的最佳接种量和优化其培养条件,并探索复合菌剂氨氮代谢途径,以期为我国鸡粪除臭菌剂的开发和利用提供科学依据。菌株筛选及鉴定。采用驯化富集—稀释平板涂布法从养鸡场的鸡粪和长期受鸡粪污染土壤中筛选脱臭菌株。将所获脱臭菌株进行回接,通过纳氏分光光度法和碘量法测定鸡粪中氨气和硫化氢的释放量,复筛获得高效除臭菌株五株,其中抑氨菌三株,分别为Y3、Y4和Y6,其对氨气的最大降解率分别为35.71%、32.95%和29.98%;硫化氢降解菌两株,分别为S1和S4,其对硫化氢的最大降解率分别为43.75%和58.82%。提取菌株Y3、Y4、Y6、S1和S4的DNA,扩增16Sr DNA后对其进行序列测定,将所获序列与Genbank数据库进行BLAST比对,发现菌株Y3、Y4、Y6、S1和S4分别为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）、纤维化纤维微菌（Cellulosimicrobium cellulans）、淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）、贝氏谷氨酸杆菌（Glutamicibacter creatinolyticus）和苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）。菌剂复配。将抑氨菌和抑硫化氢菌进行复配后,测定其对氨气和硫化氢降解能力,以期获得高效的除臭复合菌剂。经筛选,组合Y3+S1和Y6+S2降解氨气和硫化氢效果较好,其对氨气最大降解率分别为37.16%和39.25%,对硫化氢最大降解率为79.41%和76.92%。为获得最佳菌株配比,以菌株组合Y3+S1和Y6+S2为基础,再次复配菌剂。经筛选,组合Y3+S1+Y4（复合菌剂Y3S1Y4）对氨气和硫化氢的降解率最高,其最大氨气和硫化氢降解率分别为52.28%和65.22%。菌剂最佳接种量和生物学特性研究。为获得复合菌剂的最佳除臭效果,研究了复合菌剂Y3S1Y4接种量对鸡粪氨气和硫化氢释放量的影响,结果表明:复合菌剂接种量为10%时氨气降解效果最佳,最大氨气降解率为50.52%,而当接种量为8%时的硫化氢降解效果最佳,最大硫化氢降解率78.37%。为获得菌剂最佳培养条件,对菌剂Y3S1Y4的最适p H、温度、碳源、碳氮比进行研究,结果表明:菌剂Y3S1Y4最适培养条件为温度40℃,p H 8.0,碳源乙酸钠,碳氮比2/1。复合菌剂氨氮代谢途径研究。好氧条件下,分别以NH4+-N、NO2--N、NO3--N和NH2OH-N作为复合菌剂Y3S1Y4的唯一氮源和鸡粪的水溶液作为复合菌剂Y3S1Y4唯一营养源,通过测定培养液p H、菌液光密度、NH4+-N、NO2--N、NO3--N和NH2OH-N的含量变化,明确复合菌剂Y3S1Y4在降氨过程中可能的代谢途径。结果表明:菌剂Y3S1Y4以CH3COONa为唯一碳源和NH4+为唯一氮源进行代谢时,NH4+-N的浓度由2.97 mg/m L降至0.76 mg/m L,并生成中间产物羟胺氮、亚硝态氮和硝态氮,表明菌剂Y3S1Y4具有异养硝化能力;菌剂以NO2--N和NO3--N为唯一氮源进行代谢时,硝态氮下降而亚硝态氮含量维持不变,该过程发生了硝态氮转化为亚硝态氮再转化为含氮气体的反应,表明菌剂Y3S1Y4能够将硝态氮转化为亚硝态氮,具有好氧反硝化能力;菌剂Y3S1Y4以NH2OH-N为唯一氮源进行代谢时,NH2OH去除量大于硝态氮和亚硝态增加量,表明菌剂Y3S1Y4可能存在代谢途径:NH 2OH（?）含氮气体NO2-（?）NO3-;菌剂Y3S1Y4以鸡粪水溶液为营养源进行代谢时,鸡粪主要含氮化合物—NH4+含量由1.35 mg/m L降至0.64 mg/m L,推测菌剂Y3S1Y4利用鸡粪中的氨氮进行生长是其抑制鸡粪氨气产生的主要原因。综上所述,复合菌剂Y3S1Y4可能存在脱氮途径为异养硝化途径:NH4+（?）NH 2OH（?）含氮气体NO2-（?）NO3-和好氧反硝化途径:NO3-（?）NO2-（?）含氮气体。