研究背景:分枝杆菌分为结核分枝杆菌复合群（MTC）、非结核分枝杆菌(NTM)、麻风分枝杆菌。分枝杆菌感染是HIV/AIDS患者最常见的机会性感染之一。随着HIV/AIDS在全球的蔓延，HIV/AIDS合并结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌感染的发病率迅速上升。全球3530万HIV感染者中至少1/3有结核潜伏感染,结核与HIV共感染的患者比不合并HIV感染者可能发展为活动性结核病的几率大29.6（27.1-32.1）倍，结核病是导致HIV感染者死亡的主要原因，占HIV相关死亡的1/5。NTM是重要的条件致病分枝杆菌，迄今为止已发现150余种NTM,已证实超过50多种的NTM对人类具有致病性，而且致病性菌种的数量正在不断增加。NTM在HIV感染者中的发病率与流行高于不合并HIV感染者，艾滋病在全球流行后，NTM感染的流行情况发生了根本性的改变,NTM感染的发病率迅速上升,在欧美有高达25％~50%的艾滋病患者合并NTM感染。NTM病与结核病有着相似的临床表现与体征，且抗酸染色涂片也呈阳性，易误诊为结核病。艾滋病合并分枝杆菌感染发生的种类、频率随着各国、各地区的社会经济文化、环境不同，存在区域性差异，各地分枝杆菌感染谱也不一样。不同菌种的分枝杆菌在临床治疗和耐药情况方面也有差异。因此，对HIV/AIDS合并感染的分枝杆菌菌种进行快速、准确地鉴定，探讨其菌种分布特征，对临床诊断和治疗具有重要的意义。　　HIV/AIDS患者合并感染的结核分枝杆菌对抗结核药物的耐药率明显高于HIV阴性者，其中以耐INH和RFP最为严重。AIDS合并的结核病不仅仅是对单一抗结核药物的耐药率增高,多重耐药结核（MDR-TB）和广泛耐药结核（XDR-TB）的情况也十分严重。美国的一项研究指出，HIV/AIDS患者较HIV阴性者发生耐多药结核病的危险性明显增高，前者高达19%，后者仅6%。NTM细胞表面疏水性高，其细胞壁是阻止抗结核药物进入细胞的屏障，因此，除海分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌外，大多数NTM对常用的一线抗结核药呈高度耐药，用常规抗结核治疗疗效不佳。HIV/AIDS患者合并感染的NTM对二线抗结核药的耐药情况分析也鲜少见文献报道，缺乏系统性的分析。　　研究目的及意义:广州地区是全国HIV高流行的地区之一，近年来HIV/AIDS合并分枝杆菌感染的发病率呈上升趋势，传统的分枝杆菌检测方法操作繁琐且培养时间较长，由于缺乏有效的菌种鉴定手段，临床上常予以抗结核治疗性诊断，因而易将NTM感染误诊为耐药结核。因此，开发快速准确的分枝杆菌检测和菌种鉴定技术，建立HIV/AIDS患者合并感染分枝杆菌耐药监测系统是目前亟待解决的问题。　　本研究采用多基因序列联合分析的方法对广州地区HIV/AIDS患者与非HIV感染者感染的分枝杆菌进行菌种鉴定，通过比较两个人群菌种分布差异，了解广州地区HIV/AIDS患者合并感染分枝杆菌菌种分布特征，并在明确菌种类型的基础上，采用以罗氏培养基为基础的比例法，对HIV/AIDS患者合并感染分枝杆菌进行药敏试验，了解广州地区HIV/AIDS患者合并感染分枝杆菌的初始表型耐药特征。本研究有助于促进HIV/AIDS合并分枝杆菌感染的早期诊断与治疗，有助于促进HIV/AIDS合并感染分枝杆菌耐药监测系统的建立，有助于监测HIV阳性人群分枝杆菌病原学及流行病学趋势，为临床治疗提供有效的依据。　　研究方法:　　1.以2009~2013年133株分离自HIV/AIDS患者的分枝杆菌为研究对象，以150株分离自非HIV感染者的分枝杆菌为对照，提取分离株基因组DNA，PCR分别扩增hsp65、16S-rDNA、16S-23S-rDNA ITS基因，PCR产物测序后经序列分析比对鉴定菌株，分析比较HIV/AIDS患者与非HIV感染者两个人群分枝杆菌感染菌种分布差异及HIV/AIDS患者相关临床资料。　　2.根据菌种鉴定结果，随机选取40株MTC和38株NTM，采用以罗氏培养基为基础的比例法，对于目前临床应用的一线和二线抗结核药物进行药物敏感性试验。　　研究结果:　　1.133株HIV/AIDS患者感染分枝杆菌中，结核分枝杆菌复合群82株（61.65%），非结核分枝杆菌51株（38.35%），非结核分枝杆菌主要为鸟分枝杆菌（15株）、鸟分枝杆菌复合群（9株）、堪萨斯分枝杆菌（7株）。　　2.150株来自非HIV感染者分枝杆菌中，结核分枝杆菌复合群126株（84.0%），非结核分枝杆菌24株（16.0%），非结核分枝杆菌主要为脓肿分枝杆菌（9株）、马西利亚分枝杆菌（4株）、鸟分枝杆菌(4株)。　　3.78株(58.65%)分枝杆菌来自CD4≤50个/μl的HIV/AIDS患者；74.19%的MAC及75%的其他NTM感染发生在CD4≤50个/μl水平。　　4.40株MTC药敏试验结果显示：MTC对10种抗结核药总耐药率为25%（10/40）,一线药耐药率为10.0%(4/40),二线药耐药率为20.0%(8/40)，其中，对EMB、AM、RBU、力克肺疾4药全敏感。其余6种药的耐药率从高到低依次为：TH1321（12.5%）、LFX（12.5%）、RFP（10.0%）、INH（5.0%）、SM（5.0%）、MFX（2.5%）　　5.38株NTM药敏试验结果显示：NTM对对氨基水杨酸异烟肼（力克肺疾，Pa）耐药率最高，为94.7%，其他依次为阿米卡星（AK）（84.2%）、链霉素(SM)（84.2%）、异烟肼(INH)(81.6%)、左氧氟沙星(LFX)(71.1%)、克拉霉素(CLA)(65.8%)、利福平(RFP)（65.8%）、莫西沙星(MFX)(42.1%)，而对丙硫异烟胺(TH1321)、乙胺丁醇(EMB)、利福布汀(RBD)较为敏感，敏感率依次为94.7%、82.1%、73.7%。　　结论:　　1.广州地区HIV/AIDS患者感染非结核分枝杆菌比例显著高于非HIV感染者且菌种更为多样，HIV/AIDS患者感染非结核分枝杆菌以鸟分枝杆菌为主而非HIV感染者以脓肿分枝杆菌为主　　2. HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染率随着CD4+水平的降低而升高，NTM感染主要发生于CD4≤50个/μl患者。　　3.广州地区HIV/AIDS患者合并感染MTC对常用抗结核药初始耐药率较低，其中，一线抗结核药中的乙胺丁醇、二线抗结核药中的阿米卡星、利福布汀、力克肺疾抑菌效果最佳。　　4.广州地区HIV/AIDS患者合并感染NTM对常用抗结核药初始耐药率较高，而丙硫异烟胺、乙胺丁醇、利福布汀对NTM有较好的抑菌效果。