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【目的】mi R-3619-5p在多种癌症类型中表达异常。本课题组前期研究发现长链非编码RNA NBR2（lnc RNA NBR2）在胃癌细胞系中高表达,发挥促癌作用,且NBR2与mi R-3619-5p存在直接结合的关系,因而本实验将进一步探讨mi R-3619-5p对胃癌细胞生物学功能的影响及其鉴别其下游靶基因。【方法】1.q RT-PCR检测mi R-3619-5p在胃癌细胞SGC7901、BGC823、MGC803与永生化胃黏膜细胞GES-1中的表达情况。2.Starbase数据库（http://starbase.sysu.edu.cn/index.php）预测与mi R-3619-5p互相结合的下游靶基因。构建mi R-3619-5p-wt野生型载体与mi R-3619-5p-mu突变型载体,双荧光素酶报告实验验证mi R-3619-5p与靶基因CALU（calumenin）之间的相互结合。3.在UALCAN网站对CALU在胃癌组织中的表达情况进行分析;在TCGA数据库找到CALU相关的临床资料,随后进行了单因素及多因素Cox回归分析。Western blot实验检测CALU在胃癌细胞SGC7901、BGC823、AGS以及永生化胃黏膜细胞GES-1中的表达情况。4.运用脂质体转染法分别将mi R-3619-5p mimic、mi R-3619-5p inhibitor与相应的对照组mimic-NC、inhibitor-NC瞬时转染胃癌细胞BGC823。构建sh-CALU的稳转BGC823细胞株,Western blot检测转染是否成功。构建sh RNA-CALU与mi R-3619-5p inhibitor共转染的BGC823细胞系,Western blot验证转染效率。5.CCK8增殖实验、划痕实验、平皿克隆实验、Transwell迁移和侵袭实验探究mi R-3619-5p、CALU对胃癌细胞BGC823细胞生物学行为的作用。6.Western blot实验分析干扰CALU后EMT相关分子（E-cadherin、β-catenin、Vimentin和Snail）的变化情况。【结果】1.q RT-PCR实验显示:与胃黏膜上皮细胞GES-1相比,mi R-3619-5p在三种胃癌细胞（SGC7901、BGC823、MGC803）中均表达下调（P＜0.01）,且在BGC823细胞中下调最明显。2.Starbase数据库预测发现mi R-3619-5p与CALU存在碱基互补的序列。双荧光素酶基因实验显示,与NC组相比,mi R-3619-5p显著抑制了CALU-wt（野生型）的双荧光素酶的活性（P＜0.001）,而突变后,与NC组相比,mi R-3619-5p未能下调CALU-mu（突变型）的荧光素酶活性,说明mi R-3619-5p与CALU存在相互结合。3.TCGA数据库分析发现相比于正常胃组织,CALU在胃癌组织中高表达（P＜0.05）,且K-M生存分析显示,高表达的CALU生存率较低表达的生存率低。4.Western blot结果发现,转染mi R-3619-5p inhibitor组与inhibitor-NC组相比CALU表达上调,而转染mi R-3619-5p mimic组与mimic-NC组相比CALU表达下调。Western blot实验表明,与GES-1相比,CALU在三种胃癌细胞（SGC7901、BGC823、AGS）中表达均增加（P＜0.05）。5.Western blot结果显示,与control组和NC组相比,sh-CALU-2转染组和sh-CALU-3转染组的CALU表达均下调（P＜0.05）,提示稳定低表达CALU的BGC823细胞株构建成功。6.CCK8增殖实验结果显示,mi R-3619-5p mimic组在24h、48h、72h的OD450值较mimic-NC组和control组小（P＜0.05）,说明细胞的增殖能力减弱;相反,mi R-3619-5p inhibitor组在24h、48h、72h的OD450值较inhibitor-NC组和Control组大（P＜0.05）,说明细胞的增殖能力增强;sh-CALU组OD450值显著低于NC组和control组（P＜0.05）,说明敲低CALU使胃癌BGC823细胞增殖能力减弱;将mi R-3619-5p inhibitor与sh-CALU共转染到BGC823细胞中,共转染组的OD450值比mi R-3619-5p inhibitor组低（P＜0.05）,说明敲低CALU可部分逆转mi R-3619-5p inhibitor的促增殖作用。7.平皿克隆实验结果显示,与mimic NC和control组相比,mi R-3619-5p mimic组的细胞克隆数量减少（P＜0.01）,相反,inhibitor组的细胞克隆数量比inhibitor NC和control组明显增多（P＜0.01）。sh-CALU组比control组和NC组的细胞克隆数量明显减少（P＜0.01）,提示sh-CALU对胃癌细胞增殖起抑制作用。与mi R-3619-5p inhibitor组相比,mi R-3619-5p inhibitor与sh-CALU共转染组的细胞克隆数量减少（P＜0.05）,同样说明敲低CALU可部分逆转mi R-3619-5p inhibitor组的促增殖作用。8.划痕实验结果表明,与mimic-NC组相比,mi R-3619-5p mimic组抑制了划痕处细胞的迁移速度（P＜0.01）;而与inhibitor-NC组相比,mi R-3619-5p inhibitor促进了细胞划痕愈合速度（P＜0.01）;sh-CALU组的愈合速度低于NC组和control组（P＜0.01）,说明敲低CALU使胃癌BGC823细胞迁移能力减弱;mi R-3619-5p inhibitor与sh-CALU共转染后发现,敲低CALU可部分逆转mi R-3619-5p inhibitor诱导的促迁移作用（P＜0.05）。9.Transwell迁移和侵袭实验结果显示,与mimic-NC组和control组相比,mi R-3619-5p mimic组迁移和侵袭的细胞数量明显下降（P＜0.01）,相反,mi R-3619-5p inhibitor组迁移和侵袭的细胞数量显著增加（P＜0.05）,证明mi R-3619-5p具有抑制细胞迁移作用。与NC组和control组相比,sh-CALU组迁移和侵袭的细胞数量明显减少（P＜0.01）,说明敲低CALU的表达会使BGC823细胞的迁移和侵袭作用减弱。mi R-3619-5p inhibitor与sh-CALU共转染后较mi R-3619-5p inhibitor组迁移和侵袭细胞数量减少（P＜0.05）,表明敲低CALU可部分逆转mi R-3619-5p inhibitor对胃癌细胞的迁移和侵袭的影响。10.Western blot结果表明,与control组和NC组相比,敲低CALU可抑制胃癌BGC823细胞中Vimentin和Snail的表达（P＜0.05）,而上调E-cadherin和β-catenin的表达（P＜0.05）,提示敲低CALU抑制了胃癌BGC823细胞发生EMT。【结论】1.mi R-3619-5p对胃癌细胞BGC823的增殖、迁移和侵袭起抑制作用。2.敲低CALU可抑制胃癌细胞BGC823的增殖、迁移、侵袭和EMT。3.敲低CALU可部分逆转mi R-3619-5p inhibitor对胃癌BGC823细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用。