【摘 要】
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目的:通过观察补气运脾汤及其补气、祛湿化痰拆方大鼠血清对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用和对EGFR-PLC-γ1-PKCα信号转导通路的影响,探讨补气运脾汤治疗食管癌的分子机理
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目的:通过观察补气运脾汤及其补气、祛湿化痰拆方大鼠血清对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用和对EGFR-PLC-γ1-PKCα信号转导通路的影响,探讨补气运脾汤治疗食管癌的分子机理,阐明食管癌中医病机的部分内涵。
方法:采用人食管癌细胞EC9706为实验对象,用补气运脾汤及其补气、祛湿化痰拆方大鼠血清处理细胞,在倒置显微镜下观察EC9706细胞形态的改变;用MTT法检测对EC9706细胞生长的影响;用Western blot检测EC9706细胞EGFR、PLC-γ1、PKCα蛋白表达水平和蛋白酪氨酸磷酸化水平。
结果:1补气运脾汤及其祛湿化痰拆方大鼠血清对EC9706细胞增殖有抑制作用,补气组大鼠血清细胞形态与对照组相似,显示出很弱的抑制作用。表明补气药物与祛湿化痰药物对抑制食管癌细胞增殖有协同增效作用。2量效关系实验显示全方组、补气组和祛湿化痰组大鼠血清浓度在10%时对食管癌细胞增殖抑制率最高,而随着血清浓度的增加抑制率均有所下降。3在人食管癌EC9706细胞可检测到较高的EGFR、PLC-γ1、PKCα蛋白分子表达。补气运脾汤及其拆方大鼠血清能够不同程度地抑制EGFR-PLC-γ1-PKCα信号通路各蛋白表达水平,以全方组作用最强,祛湿化痰组次之。
结论:1补气运脾汤及其拆方大鼠血清在一定浓度下均能抑制人食管癌细胞EC9706的生长,以全方效果最好。2补气运脾汤的两个拆方补气方和祛湿化痰方对抑制食管癌细胞增殖有协同增效作用。3补气运脾汤及其拆方大鼠血清可能通过抑制EC9706细胞EGFR-PLC-γ1-PKCα信号转导通路中各信号蛋白表达而抑制食管癌细胞增殖。4以方测证,在食管癌病变中,气虚、痰湿与EGFR-PLC-γ1-PKCα通路中各信号分子表达和转导增强有关。
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