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研究背景乳腺癌是女性最常见的一种恶性肿瘤。近年来研究发现乳腺癌也同样具有一定的免疫原性,因此免疫治疗逐渐成为了乳腺癌治疗方面的研究热点。其中程序性死亡配体-1（programmed death-ligand 1,PD-L1）和白细胞分化抗原47（cluster of differentiation 47,CD47）分别是肿瘤逃避获得性免疫监视和先天性免疫监视两个关键检查点。临床研究中免疫抑制剂常与化疗联用,但不同化疗方案联用免疫治疗时却有不同的治疗效果。因此化疗对乳腺癌组织中PD-L1和CD47表达的影响以及对肿瘤免疫微环境的影响尚不明确。本研究拟通过检测新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy,NAC）前后乳腺癌组织中PD-L1、CD47以及CD4+T细胞、CD8+T细胞表达情况,结合临床资料分析PD-L1和CD47表达与患者临床病理特征和化疗疗效及预后的关系,探讨两种免疫反应之间表达的相关性,以期更好地了解化疗对乳腺癌免疫微环境的影响,为乳腺癌化疗后联合免疫治疗的患者能否获益提供新的理论依据。目的探讨NAC对乳腺癌免疫微环境中PD-L1、CD47、CD4+T细胞和CD8+T细胞表达的影响,分析NAC前后肿瘤组织中各免疫指标表达之间的相关性,及其与临床病理特征和预后的关系。方法对2016年5月至2017年7月郑州大学第一附属医院接受过新辅助化疗的77例乳腺癌患者进行回顾性分析。采用免疫组织化学法检测患者NAC前乳腺穿刺活检组织及NAC后肿瘤切除组织中PD-L1、CD47、CD4+T细胞及CD8+T细胞的表达,采用配对卡方检验分析NAC前及NAC后各指标的表达变化;用卡方检验评估NAC前PD-L1、CD47表达与患者临床病理特征的关系;Spearman相关分析讨论各指标间表达的相关性及其与化疗疗效的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank检验分析PD-L1、CD47、CD4+T细胞及CD8+T细胞表达是否与患者无病生存期（Disease-Free Survival,DFS）和总生存期（Overall survival,OS）具有相关性。结果①NAC前后各免疫指标表达情况:77例患者中,NAC前CD47阳性表达42例,阴性表达35例;PD-L1阳性表达25例,阴性表达52例。因NAC后有16例病例表现为病理性完全缓解（pathologic complete response,pCR）,而PD-L1、CD47只判读肿瘤组织中细胞表达情况,故未再测定这16例组织的PD-L1、CD47表达。其余61例NAC后CD47阳性表达率23.0%（14/61）明显低于NAC前的阳性表达率55.7%（34/61）（P＜0.001）;而PD-L1阳性表达率在NAC前后无明显差异[34.4%（21/61）比 31.1%（19/61）]（P＞0.05）。77 例患者中,NAC后CD4+T细胞阳性表达率63.6%（49/77）显著低于NAC前的阳性表达率94.8%（73/77）（P＜0.001）。CD8+T细胞NAC前后阳性表达率未见明显差异[97.4%（75/77）比94.8%（73/77）]（P＞0.05）。②NAC前PD-L1和CD47与临床病理特征的关系:77例患者NAC前乳腺癌组织中CD47表达与患者年龄（P=0.048）和组织学分级有关（P=0.015）。而NAC前CD47表达与ER、PR、Ki-67、HER-2、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移、pTNM分期和分子分型无关（P＞0.05）。PD-L1表达情况与上述临床病理特征均未见相关（P＞0.05）。③免疫指标间表达的相关性:NAC前CD47和PD-L1表达之间存在正相关（rs=0.410,P＜0.001）,PD-L1和CD4+T细胞、CD8+T细胞表达之间无相关性（P=0.747;P=0.158）,CD47和CD4+T细胞、CD8+T细胞表达之间无相关性（P=0.854;P=0.405）。NAC后PD-L1 和CD4+T细胞表达之间无相关性（P=0.162）,CD47和CD4+T细胞表达之间无相关性（P=0.948）,PD-L1和CD47表达之间未见相关性（P＞0.05）。④免疫指标与预后和治疗效果的关系:NAC前各免疫指标与患者NAC治疗效果无相关性（P＞0.05）。NAC后CD4+T细胞和CD8+T细胞表达情况与未达到pCR也呈正相关（rs=0.345,P=0.002;rs=0.319,P=0.005）。NAC前CD8+T细胞表达情况与患者DFS有关（P=0.0365）,其余指标表达情况均与OS和DFS无关（P＞0.05）。结论①NAC前CD47表达与乳腺癌患者的年龄和组织学分级有关,并且与PD-L1表达有关,说明获得性免疫反应和先天性免疫反应可能共同参与了乳腺癌抗肿瘤免疫过程。②NAC会改变乳腺癌中CD47和CD4+T细胞表达情况,而对PD-L1和CD8+T细胞影响较小,因此建议患者最好在化疗后检测CD47的表达,避免转阴性患者无法从免疫治疗中获益。③NAC前CD8+T细胞高表达可能与患者更长的无病生存期有关,而NAC后肿瘤组织中CD4+T细胞和CD8+T细胞表达更多。