【摘 要】
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目的:Foxp3+Treg细胞在多种生物学过程中起重要作用，该群细胞的水平和功能与多种疾病的发生，发展密切相关。本课题组主要探讨低氧及其模拟物CoCl2 对细胞Foxp3 表达的影响及分子机理，研究低氧影响调节性T细胞功能的作用机制。方法:1. 应用1％O2 低氧及其模拟化合物CoCl2 处理人T 淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞、人单核细胞白血病细胞株U937细胞不同时相后Western b
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目的:Foxp3+Treg细胞在多种生物学过程中起重要作用，该群细胞的水平和功能与多种疾病的发生，发展密切相关。本课题组主要探讨低氧及其模拟物CoCl2 对细胞Foxp3 表达的影响及分子机理，研究低氧影响调节性T细胞功能的作用机制。
方法:
1. 应用1％O2 低氧及其模拟化合物CoCl2 处理人T 淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞、人单核细胞白血病细胞株U937细胞不同时相后Western blot检测HIF-1α表达情况，同时应用Real-time PCR 检测Foxp3 表达水平变化。
2. 应用RNA 干扰技术抑制Jurkat细胞、U937细胞HIF-1α基因表达，然后分别检测HIF-1α及Foxp3 表达水平变化。建立稳定诱导表达HIF-1α的U937细胞系，然后检测Foxp3 表达水平变化。
3. 应用NFATc2 抑制剂，抑制转录因子NFATc2 功能，检测低氧条件下Foxp3 表达水平的变化。
4. 应用荧光素报告基因(luc)检测转录因子AML1 对Foxp3 表达的影响。
结果:
1. Jurkat细胞、U937细胞经过1％O2 低氧及其模拟化合物CoCl2处理，HIF-1α有明显累积，但Foxp3 表达明显下降。
2. Jurkat细胞、U937细胞的HIF-1α基因经siRNA 干扰抑制其表达后，低氧模拟化合物CoCl2 依然可以下调Foxp3 表达。U937细胞过表达HIF-1α，Foxp3 表达无明显变化。
3. NFATc2 抑制剂减缓了低氧及其模拟物对Foxp3的下调作用。
而转录因子AML1 则使荧光素酶报告基因的转录活性明显增强。
结论:低氧及其模拟化合物CoCl2 下调Foxp3 表达不依赖于低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α），却伴随了转录因子NFATc2、AML1 表达的变化，NFATc2和AML1 可能在直接调控Foxp3的表达。
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