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目的分别采用不同浓度的维生素C或泼尼松处理EL4细胞,观察维生素C或泼尼松对EL4细胞增殖的影响,选出不影响EL4细胞增殖的浓度用于后续实验;用细胞因子TGF-β1、IL-6、IL-23诱导EL4细胞发生Treg/Th17分化向Th17偏移,分别于分化发生前、后用维生素C和泼尼松进行干预,观察维生素C对Treg/Th17失衡的调节作用是否与泼尼松相似。方法将浓度分别为10mM、8mM、6mM、4mM、2mM、1mM、0.5mM、0.2mM的维生素C作用于对数生长期的EL4细胞24h、48h、72h,CCK-8法检测细胞存活率;将浓度分别为100uM、10 uM、1 uM、0.1uM、0.01 uM、0.001uM、0.0001 uM、0.00001 uM的泼尼松作用于对数生长期的EL4细胞24h、48h、72h,CCK-8法检测细胞存活率;分化前干预:分别用完培、0.2mM的维生素C、1 uM的泼尼松培养EL4细胞24h后,向培养液内加入细胞因子TGF-β1 5ng/ml、IL-6 20ng/ml、IL-23 10ng/ml,再培养48h,实时荧光定量PCR检测细胞RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的表达量,ELISA法检测培养上清中IL-17A、IL-10分泌量;分化后干预:用细胞因子TGF-β1 5ng/ml、IL-6 20ng/ml、IL-23 10ng/ml刺激EL4细胞的分化48h,发生Treg/Th17平衡向Th17偏移,然后分别加入完培、0.2mM的维生素C、1 uM的泼尼松共培养24h,实时荧光定量PCR检测细胞RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的表达量,ELISA法检测培养上清中IL-17A、IL-10分泌量。结果维生素C浓度为0.2mM时,EL4细胞增殖未受到明显影响,且细胞增殖不随作用时间的增加而改变;维生素C浓度大于0.5mM时,EL4细胞增殖受到明显抑制,且抑制作用随作用时间的增加而加强;与更低浓度的泼尼松相比,EL4细胞存活率在泼尼松浓度为100μM时最低;在不同的作用时间内,泼尼松对EL4细胞增殖无明显影响;于分化前干预,0.2mM的维生素C可使EL4细胞表达RORγt mRNA和Foxp3 mRNA增加,IL-10分泌减少,与1uM的泼尼松作用相似;分化后干预,0.2mM的维生素C可使EL4细胞表达RORγt mRNA增加,分泌IL-10减少,作用类似于分化前维生素C干预。结论维生素C能够抑制小鼠淋巴瘤EL4细胞增殖,且抑制作用与作用浓度及所用时间相关;泼尼松对小鼠淋巴瘤EL4细胞增殖无明显抑制作用;维生素C存在时,可干预将要出现的Treg/Th17分化,效果与泼尼松类似;当出现Treg/Th17失衡向Th17偏移时,维生素C对其有调节作用。