研究目的:Nrf2是氧化还原平衡的调节因子。HIF-1可以在缺氧的条件下调节机体对低氧的适应。但HIF-1对Nrf2-ARE抗氧化信号的影响目前并不十分清楚。本研究通过对野生C57BL6/J小鼠与HIF-1α转基因小鼠两种不同类型的小鼠在安静和一次性力竭运动两种情况下,检测各组小鼠骨骼肌Nrf2-ARE通路相关指标的的变化。探讨HIF-1α对Nrf2-ARE抗氧化通路的影响以及在运动引起的氧化应激中的作用。研究方法:HIF-1α转基因鼠和野生型C57BL/6J小鼠各20只。随机分为4组分别为野生安静组(WC)、野生运动组(WE)、转基因安静组(HC)和转基因运动组(HE)。正式实验时小鼠做一次性递增负荷跑台运动直至力竭。运动后即刻取材,脱颈处死后取两侧小腿骨骼肌。骨骼肌Nrf2-ARE结合活性采用酶联免疫法(ELISA)测定。RT-PCR测定骨骼肌Nrf2下游抗氧化基因表达。Western Blot法测定骨骼肌HIF-1α、Nrf2、pNrf2(ser40)、核蛋白Nrf2及抗氧化蛋白的表达。小鼠骨骼肌ROS采用高质荧光测定法测定。研究结果:(1)与WC组相比,HC组小鼠骨骼肌Nrf2mRNA和蛋白表达明显增加,Nrf2-ARE结合活性显著增加,靶基因SOD1、SOD2、NQO-1mRNA表达显著增加,且NQO-1蛋白表达显著增加,骨骼肌ROS水平极显著下降。(2)与WC组相比,WE组小鼠Nrf2mRNA表达明显增加,Nrf2-ARE结合活性显著增加。骨骼肌SOD1、SOD2mRNA表达增加,ROS有增加趋势;与HC组相比,HE组小鼠骨骼肌核蛋白Nrf2含量显著性增加,SOD2和NQO-1mRNA表达量显著增加,NQO-1蛋白表达显著增加,ROS无明显变化。(3)与WE组相比,HE组小鼠Nrf2mRNA和蛋白表达明显增加,Nrf2核蛋白及pNrf2表达增加。骨骼肌SOD2和NQO-1mRNA表达增加,NQO-1蛋白表达显著增加,骨骼肌ROS含量极显著下降。研究结论:(1)运动可促进HIF-1α转基因鼠骨骼肌内Nrf2核易位及磷酸化。(2)HIF-1α适当的高表达可提高小鼠骨骼肌的抗氧化能力,对运动引起的骨骼肌ROS的消除有积极的调控作用。