成都赛鸽源大肠埃希菌和肠球菌分离鉴定及对常用抗生素的耐药性分析

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赛鸽作为特定饲养的比赛用飞禽,活动范围广,不同群体之间存在活动轨迹交叉,是跨地区传播细菌耐药的媒介之一。大肠埃希菌和肠球菌是赛鸽消化道内主要共生菌,也是诸多耐药基因的贮藏菌,可以作为细菌耐药性的指示菌,而目前相关研究较少,对于赛鸽常用抗生素的耐药情况还不清楚,因此对赛鸽大肠埃希菌和肠球菌开展耐药性调查具有重要公共卫生学意义。本研究从成都市部分赛鸽棚采集新鲜鸽粪分离大肠埃希菌和肠球菌,进行鸽棚常用抗生素耐药性检测和耐药基因检测,取得了如下成果:1.从成都市青白江区及双流区6个赛鸽棚共采集196份新鲜赛鸽粪便样本。经选择培养、镜检、16S rRNA基因扩增和测序,分离出179株大肠埃希菌(分离率91.32%)和151株肠球菌(分离率77.04%)。使用纸片扩散法、微量肉汤稀释法对分离的大肠埃希菌和肠球菌进行4种抗菌药物敏感性试验,结果显示:受试179株大肠埃希菌表现对氟苯尼考耐药水平最高,达到57.54%,对多西环素和环丙沙星耐药率相对较低,分别为31.28%、35.75%。未发现多黏菌素B耐药株。幼鸽源大肠埃希菌对多西环素耐药性极显著高于亚鸽和成鸽源大肠埃希菌(P<0.01);高频用药组对多西环素、氟苯尼考的耐药性极显著高于低频用药组(P<0.01)。有15株大肠埃希菌对3类及以上抗菌药物表现出耐药性,多重耐药率为8.37%;受试151株肠球菌对多西环素耐药率最高,为56.29%,其次是环丙沙星,耐药率为41.05%,对氟苯尼考耐药率最低,为28.47%。全部菌株对多黏菌素B均耐药。幼鸽源肠球菌对多西环素、环丙沙星、氟苯尼考耐药性极显著高于亚鸽和成鸽源肠球菌(P<0.01),高频用药组对多西环素、环丙沙星、氟苯尼考的耐药性极显著高于低频用药组(P<0.01)。有28株肠球菌对3类及以上抗菌药物表现出耐药性,多重耐药率为18.54%。2.用PCR法对多重耐药赛鸽源大肠埃希菌和肠球菌分离株进行4类9种耐药基因检测,结果显示,15株多重耐药大肠埃希菌中四环素类耐药基因tetA和tetB检出率为100%,未检出tetM;PMQR基因qnrS检出率为53.53%,未检出qnrD;氟苯尼考耐药基因floR检出率为86.67%,未检出fexA和fexB;多黏菌素耐药基因mcr-1检出率为40%。28株多重耐药肠球菌中四环素类耐药基因tetM检出率为7.14%,未检出tetA、tetB;氟苯尼考耐药基因fexA和fexB检出率分别为10.71%和7.14%,未检出floR;受测肠球菌中未检测到PMQR基因qnrS、qnrD和多黏菌素耐药基因mcr-1。
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