【摘 要】
：
【目的】探讨海马TRPV4在东莨菪碱所致小鼠认知功能障碍中的作用及其可能分子机制。【方法】1)动物分组:8周龄ICR雄性小鼠（35-40g）,随机分为生理盐水组（NS）、模型（SCP+NS）、HC067047药物干预组（SCP+HC067047）;2)动物模型的建立:给予小鼠单次腹腔注射东莨菪碱（Scopolamine,SCP）,建立实验动物模型;3)TRPV4特异性抑制剂HC067047干预:给
论文部分内容阅读
【目的】探讨海马TRPV4在东莨菪碱所致小鼠认知功能障碍中的作用及其可能分子机制。【方法】1)动物分组:8周龄ICR雄性小鼠（35-40g）,随机分为生理盐水组（NS）、模型（SCP+NS）、HC067047药物干预组（SCP+HC067047）;2)动物模型的建立:给予小鼠单次腹腔注射东莨菪碱（Scopolamine,SCP）,建立实验动物模型;3)TRPV4特异性抑制剂HC067047干预:给予小鼠腹腔注射TRPV4抑制剂HC067047（10mg/kg）,7小时后,腹腔注射SCP建模。4)行为学检测:使用新旧位置识别实验、新旧事物识别实验、Y-maze实验（非自发交替）评估小鼠的学习记忆能力;5)采用免疫组织化学法检测小鼠海马Neu N,DCX的表达;采用Weastern blotting法检测海马β-Tubulin、TRPV4、Camk IIα、p-Camk IIα、Caspase-3、Bax、Bcl-2、ACh E、PSD-95、SYP、CD68、IL-1β、BACE-1、APP、Tau、pTau的表达。【结果】1)与NS组小鼠相比,SCP组小鼠海马TRPV4蛋白（P＜0.05）表达水平明显上调;2)与NS组小鼠相比,SCP+NS组小鼠新位置识别指数明显下调（P＜0.001）,新物体识别指数明显下降（P＜0.01）,在新臂所花费的时间明显减少（P＜0.05）,而TRPV4特异性抑制剂HC067047处理可以改善小鼠上述认知功能障碍（P＜0.05）;3)与NS组小鼠相比,SCP+NS组小鼠海马内ACh E蛋白表达水平明显上调（P＜0.05）,而HC067047干预后,ACh E蛋白水平明显下降（P＜0.01）;4)与NS组小鼠相比,各组小鼠海马内PSD95、SYP、Glu R1、Glu R2突触蛋白水平并没有明显变化ns P);5)与NS组相比,SCP+NS组小鼠海马内DCX和Neu N阳性细胞数显著减少（P＜0.05）,HC067047干预后,小鼠海马内DCX和Neu N阳性细胞数明显增加（P＜0.05）;6)与NS组小鼠相比,SCP+NS组小鼠海马内Camk IIα、p-Camk IIα、Caspase-3、Bax蛋白水平明显上调（P＜0.05）,药物HC067047干预后,小鼠海马内Camk IIα、p-Camk IIα、Caspase-3、Bax表达显著下降（P＜0.05）,而各组小鼠海马内Bcl-2蛋白表达无显著差异（ns P）;7)与NS组小鼠相比,SCP+NS组小鼠海马内Bax/Bcl-2比值明显增加（P＜0.01）,HC067047干预后,小鼠海马内Bax/Bcl-2比值显著减低（P＜0.01）;8)与NS组相比,各组小鼠海马内Tau、p-Tau、BACE1、APP蛋白表达无显著差异;9)与NS组相比,各组小鼠海马内CD68、IL-1β蛋白表达无统计学意义。【结论】TRPV4过表达可能激活下游效应分子钙调蛋白,进而促使凋亡相关蛋白高表达,诱发神经元兴奋性死亡,最终导致小鼠认知功能障碍;阻断TRPV4可改善小鼠认知功能障碍。
其他文献
目的:探讨葛根素（Puerarin,Pue）在1型糖尿病（Type 1diabetes mellitus,T1DM）中的防治作用,为葛根素应用于T1DM的防治研究提供实验数据。方法:体外培养选用小鼠胰岛瘤细胞MIN6进行细胞实验。CCK8法筛选H2O2建立细胞损伤模型以及Pue保护作用的最佳条件;20μmol/L Pue单独预处理6 h、ERS抑制剂GSK2606414、JAK2激活剂Coumer
【背景与目的】:动脉粥样硬化（Atherosclerosis,As）是冠心病、脑梗死以及大多数外周血管病的主要病理学基础。大量研究表明,As主要在脂质代谢和炎症两方面作用下形成,其中脂质代谢障碍是其发生发展的主要危险因素,巨噬细胞脂质蓄积形成泡沫细胞是其发生发展的病理特征,而ABCA1介导的胆固醇流出减少是泡沫细胞形成的主要因素。ABCA1作为膜蛋白能够利用ATP通过载脂蛋白a-1从细胞中去除脂质
目的:果蝇dfmr1与人类脆性X智力低下基因1（Fragile X mental retardation gene 1,FMR1）序列高度同源、功能相似,在果蝇不同生长阶段dfmr1表达水平不同且受到mi RNA的调控。本课题组前期研究发现,mir-219在果蝇中可以调控dfmr1的表达,但对果蝇生存能力、表型及行为学的影响并不清楚。因此,本文开展Elav-Gal4＞mir-219转基因果蝇功能的
目的:探究黄芩苷（Baicalin）对急性淋巴细胞白血病（Acute lymphoblastic leukemia,ALL）细胞株Reh增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制,旨在为将Baicalin应用于ALL临床治疗提供新的策略以及理论参考。方法:将Reh细胞进行体外常规培养,绘制细胞生存曲线。Baicalin处理或联合凋亡抑制剂Z-VAD-FMK或活性氧（Reactive oxygen spec
【目的】探讨BACE1在ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡中的作用及机制。【方法】（1）体外培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度的ox-LDL在不同时间点处理内皮细胞,以建立ox-LDL诱导的内皮细胞损伤模型。通过观察细胞形态、数量和密度,检测细胞存活率,确定ox-LDL处理内皮细胞的最适浓度和最佳时间。（2）将培养的HUVECs随机分为两组:空白对照组、100μg/mL ox-LDL处理组,通过LDH试
背景:急性B淋巴细胞白血病（B cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL）是最常见的急性白血病之一。近年来,尽管B-ALL的预后大幅上升,但其复发生存率较低,而复发的主要原因是大部分化疗药物仅通过诱导细胞凋亡发挥抗白血病作用,以致白血病细胞对化疗药物产生耐药性。因此,探索可诱导多种细胞程序性死亡（Programmed cell death,PCD）的药物,从而
目的:探究低剂量辐射对机体mi RNA影响,筛选低剂量辐射生物标志物,为低剂量辐射损伤防护提供实验基础和理论依据。方法:分别用12.5μGy/h,25.0μGy/h,50.0μGy/h辐照C57BL/6J小鼠120 d,每天辐照8 h,摘眼球取血,分离血清,提取血清总RNA,建立小RNA文库,测序得到差异表达mi RNA,并运用GO和KEGG对差异表达mi RNA进行靶基因富集性等生物信息学分析。
目的:乳腺癌是全球范围内女性患病率最高的癌症,也是导致我国女性癌症死亡的首要因素。SUMO特异性蛋白酶（SENPs）是细胞内SUMO稳态维持的核心调控因子。SENP3是SENPs家族成员之一,它通过介导靶蛋白的去SUMO来调节各种胞内蛋白的功能。研究表明,SENP3在头颈癌、胃癌、肺癌等多种癌症中异常表达,并导致细胞增殖、迁移等细胞过程发生异常;但其在乳腺癌增殖和迁移中的功能并不清楚。基于我们前期
【研究背景与目的】高同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）是神经退行性疾病的高危险因素,目前认为其诱导神经变性的机制与神经炎症有关,但Hcy如何诱导神经炎症及其防治仍有待进一步深入探讨。细胞焦亡可诱导炎症反应,琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase,SDH）亚基A（SDHA）表达异常也将引发炎症反应。因此,本研究将探索Hcy诱导神经炎症反应的机制是否与其促进细胞焦亡
目的:内皮细胞损伤是动脉粥样硬化的起始因素之一。姜黄素作为一种非特异性抗氧化和抗炎药物,已广泛应用于脂代谢紊乱疾病的研究。然而,姜黄素是否能减轻H2O2诱导的内皮细胞损伤及其相关机制尚不清楚。因此,本项目旨在探究姜黄素对人脐静脉内皮细胞的保护作用及其机制。方法:通过H2O2建立内皮细胞损伤模型,筛选出姜黄素的作用浓度和时间;HE染色探究姜黄素对内皮细胞的形态学的影响;Western Blot检测炎