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摘要：目的 观察针刺“内关”、“郄门”对心肌缺血/再灌注过程中高敏C反应蛋白（hs-CRP）和同型半胱氨酸（Hcy）的影响，探讨经穴与脏腑间特异性联系的作用机制。方法 60只大鼠随机分为6组。假手术组只穿线不结扎冠状动脉，其余各组制备缺血/再灌注动物模型，其中3个针刺穴位组分别于电针大鼠“内关”、“郄门”、“合谷”20 min后，结扎冠状动脉左前降支40 min，心电图监测，再次电针上述穴位20 min，松扎，恢复冠脉灌流60 min；假手术组穿线后100 min、模型Ⅰ组结扎40 min、模型Ⅱ组结扎60 min后，松扎再灌注60 min后实验结束，抽取静脉血，分离血清和血浆，分别采用免疫比浊法和酶法检测血清hs-CRP和血浆Hcy含量的变化。结果 内关组、郄门组hs-CRP、Hcy明显降低（P<0.01）；内关组血清hs-CRP、血浆Hcy含量明显低于模型组和合谷组（P<0.01）；郄门组hs-CRP、Hcy含量与内关组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 针刺手厥阴心包经穴可明显降低hs-CRP、Hcy的含量，对心肌细胞呈现出良好的保护作用。
关键词：针刺；心肌缺血/再灌注；高敏C反应蛋白；同型半胱氨酸；大鼠
中图分类号：R245.3 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）02-0041-03
一。研究表明，高敏C反应蛋白（hs-CRP）是重要的炎症标志物之一，能够较为敏感、准确地反映出慢性炎症的发生，已成为公认的预测未来心血管事件发生危险的有效指标[1]。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）血症是冠心病的独立危险因素，研究发现30%的冠心病患者血浆Hcy水平呈轻中度增高[2]。我们以
往的工作表明，针刺内关、郄门等穴可有效保护心肌细胞，降低心肌缺血/再灌注损伤的程度[3]。本研究在前期工作基础上，观察针刺对心肌缺血/再灌注损伤大鼠hs-CRP、Hcy的影响，旨在探讨其作用机制及经穴与脏腑之间的特异性联系。
1 实验材料
1.1 动物
Wistar大鼠60只，清洁级，体质量为250～280 g，雌雄各半，山西医科大学动物中心提供，许可证号：SCXK（晋）2009- 0001。
1.2 试剂与仪器
hs-CRP试剂盒购自北京康思润业生物技术有限公司；Hcy检测试剂盒购自北京万泰德瑞诊断技术有限公司。全自动生化分析仪：美国贝克曼库尔特有限公司，Unicel DXC 800 Synchron Clinical System。
2 实验方法
2.1 分组
按随机数字表法将60只大鼠随机分为假手术组、模型I组、模型Ⅱ组、内关组、郄门组、合谷组，每组10只。
2.2 造模
动物称重，10%乌拉坦注射液（1 g/kg）行腹腔麻醉，将麻醉后的动物固定在鼠板上，行气管切开术，并连接至动物呼吸机（DH-150，浙江医科大学医学仪器厂），同时记录术前的Ⅱ导联心电图。在胸骨左侧第3、4肋间（亦可选择搏动较明显处）剪开皮肤，钝性分离各层肌肉组织，暴露肋骨。在第3、4肋骨下用止血钳将肌肉分离，钳住并剪断第4肋骨，开胸器放入切口处，暴露心脏，打开心包膜，轻提心耳翻转心脏，暴露冠状动脉，在冠状动脉左前降支根部用无创性小圆针穿零号医用缝合线，心电图监测，穿线处置一硅胶管后，与左前降支一并结扎，以左前室壁发绀并向外膨胀及心电图S-T段抬高为标志。止血钳关闭胸腔并描记心电图。40 min后打开胸腔，剪开硅胶管，恢复左前降支灌流，60 min后腹腔静脉取血，分离血清和血浆，观察hs-CRP、Hcy的含量。
2.3 针刺
假手术组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，记录100 min内心电图S-T段变化，静脉取血，分离血清、血浆。模型Ⅰ组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，结扎左前降支40 min，松扎，再灌注60 min后，静脉取血，分离血清、血浆。模型Ⅱ组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，结扎左前降支60 min，松扎，再灌注60 min后，静脉取血，分离血清、血浆。内关组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，关闭心电图机。取双侧“内关”，G6805-1型治疗仪疏密波电针20 min，频率30～100 Hz，强度1 mA左右，大鼠前肢出现与电针频率相一致的轻微颤动，去电针。心电图监测，结扎左前降支40 min后，再次电针“内关”20 min，松扎，再灌注60 min后，静脉取血，分离血清、血浆。郄门组和合谷组分别取相应的穴位进行电针刺激，方法同内关组。穴位参照文献[4]定位。
2.4 指标检测方法
5 讨论
2009年国际临床生物化学学会制定实验室医学实践指南，hs-CRP被认定为心血管事件预防评价的生物学标志物[5]。，健康人体CRP浓度正常范围内的升高与未来发生心血管疾病的危险性存在一定关系。hs-CRP浓度的基线水平在最高四分位数的健康人群，其未来发生局部缺血性脑卒中、心肌梗死以及周围血管性疾病的危险性是位于最低四分位数的健康人群的2～4倍，危险性显著升高。
Hcy是一种含硫分子的氨基酸，是蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的一个重要中间产物。许多研究表明，高Hcy血症是冠心病的独立危险因素，其危险程度随着浓度的升高而增加。Hcy通过促进血小板的激活，增强凝血功能，促进血管平滑肌增值、细胞毒作用、诱导内皮细胞功能障碍及刺激低密度脂蛋白氧化等多种途径损伤血管内皮细胞，同时刺激血管平滑肌细胞生长，最终导致心脑血管疾病[6-8]。
经穴与脏腑之间的密切关系已被多年的临床和实验所证实。本实验通过针刺手厥阴心包经穴对心肌缺血再灌注损伤心肌保护作用的研究，进一步阐明心包经与心之间的特异性联系。内关为手厥阴心包经络穴，别走手少阳三焦经。《针灸甲乙经》：“实则心暴痛，虚则烦心，心悲，内关主之。”长期以来，内关一直是治疗心胸疾病的首选穴。郄门穴为手厥阴心包经郄穴，是脏腑经气深聚的部位，长于治疗痛证。《针灸甲乙经》：“心痛，衄哕呕血，惊恐畏人，神气不足，郄门主之。”说明郄门在治疗心胸疾病方面有特异性作用。
关键词：针刺；心肌缺血/再灌注；高敏C反应蛋白；同型半胱氨酸；大鼠
中图分类号：R245.3 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）02-0041-03
一。研究表明，高敏C反应蛋白（hs-CRP）是重要的炎症标志物之一，能够较为敏感、准确地反映出慢性炎症的发生，已成为公认的预测未来心血管事件发生危险的有效指标[1]。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）血症是冠心病的独立危险因素，研究发现30%的冠心病患者血浆Hcy水平呈轻中度增高[2]。我们以
往的工作表明，针刺内关、郄门等穴可有效保护心肌细胞，降低心肌缺血/再灌注损伤的程度[3]。本研究在前期工作基础上，观察针刺对心肌缺血/再灌注损伤大鼠hs-CRP、Hcy的影响，旨在探讨其作用机制及经穴与脏腑之间的特异性联系。
1 实验材料
1.1 动物
Wistar大鼠60只，清洁级，体质量为250～280 g，雌雄各半，山西医科大学动物中心提供，许可证号：SCXK（晋）2009- 0001。
1.2 试剂与仪器
hs-CRP试剂盒购自北京康思润业生物技术有限公司；Hcy检测试剂盒购自北京万泰德瑞诊断技术有限公司。全自动生化分析仪：美国贝克曼库尔特有限公司，Unicel DXC 800 Synchron Clinical System。
2 实验方法
2.1 分组
按随机数字表法将60只大鼠随机分为假手术组、模型I组、模型Ⅱ组、内关组、郄门组、合谷组，每组10只。
2.2 造模
动物称重，10%乌拉坦注射液（1 g/kg）行腹腔麻醉，将麻醉后的动物固定在鼠板上，行气管切开术，并连接至动物呼吸机（DH-150，浙江医科大学医学仪器厂），同时记录术前的Ⅱ导联心电图。在胸骨左侧第3、4肋间（亦可选择搏动较明显处）剪开皮肤，钝性分离各层肌肉组织，暴露肋骨。在第3、4肋骨下用止血钳将肌肉分离，钳住并剪断第4肋骨，开胸器放入切口处，暴露心脏，打开心包膜，轻提心耳翻转心脏，暴露冠状动脉，在冠状动脉左前降支根部用无创性小圆针穿零号医用缝合线，心电图监测，穿线处置一硅胶管后，与左前降支一并结扎，以左前室壁发绀并向外膨胀及心电图S-T段抬高为标志。止血钳关闭胸腔并描记心电图。40 min后打开胸腔，剪开硅胶管，恢复左前降支灌流，60 min后腹腔静脉取血，分离血清和血浆，观察hs-CRP、Hcy的含量。
2.3 针刺
假手术组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，记录100 min内心电图S-T段变化，静脉取血，分离血清、血浆。模型Ⅰ组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，结扎左前降支40 min，松扎，再灌注60 min后，静脉取血，分离血清、血浆。模型Ⅱ组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，结扎左前降支60 min，松扎，再灌注60 min后，静脉取血，分离血清、血浆。内关组：冠状动脉左前降支根部穿线后，心电图监测，关闭心电图机。取双侧“内关”，G6805-1型治疗仪疏密波电针20 min，频率30～100 Hz，强度1 mA左右，大鼠前肢出现与电针频率相一致的轻微颤动，去电针。心电图监测，结扎左前降支40 min后，再次电针“内关”20 min，松扎，再灌注60 min后，静脉取血，分离血清、血浆。郄门组和合谷组分别取相应的穴位进行电针刺激，方法同内关组。穴位参照文献[4]定位。
2.4 指标检测方法
5 讨论
2009年国际临床生物化学学会制定实验室医学实践指南，hs-CRP被认定为心血管事件预防评价的生物学标志物[5]。，健康人体CRP浓度正常范围内的升高与未来发生心血管疾病的危险性存在一定关系。hs-CRP浓度的基线水平在最高四分位数的健康人群，其未来发生局部缺血性脑卒中、心肌梗死以及周围血管性疾病的危险性是位于最低四分位数的健康人群的2～4倍，危险性显著升高。
Hcy是一种含硫分子的氨基酸，是蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的一个重要中间产物。许多研究表明，高Hcy血症是冠心病的独立危险因素，其危险程度随着浓度的升高而增加。Hcy通过促进血小板的激活，增强凝血功能，促进血管平滑肌增值、细胞毒作用、诱导内皮细胞功能障碍及刺激低密度脂蛋白氧化等多种途径损伤血管内皮细胞，同时刺激血管平滑肌细胞生长，最终导致心脑血管疾病[6-8]。
经穴与脏腑之间的密切关系已被多年的临床和实验所证实。本实验通过针刺手厥阴心包经穴对心肌缺血再灌注损伤心肌保护作用的研究，进一步阐明心包经与心之间的特异性联系。内关为手厥阴心包经络穴，别走手少阳三焦经。《针灸甲乙经》：“实则心暴痛，虚则烦心，心悲，内关主之。”长期以来，内关一直是治疗心胸疾病的首选穴。郄门穴为手厥阴心包经郄穴，是脏腑经气深聚的部位，长于治疗痛证。《针灸甲乙经》：“心痛，衄哕呕血，惊恐畏人，神气不足，郄门主之。”说明郄门在治疗心胸疾病方面有特异性作用。