【摘 要】
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目的:研究CIB1表达对U251、U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能的作用机制,初步阐明了CIB1在胶质瘤中的作用及可能机制。方法:1.下载GEO、TCGA数据库中胶质瘤基因表达谱数据,分析CIB1 mRNA在胶质瘤组织和正常脑组织中的表达情况;利用GEPIA在线数据库分析CIB1表达与胶质瘤预后的相关性。2.CIB1过表达对U251、U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响pGV492-
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目的:研究CIB1表达对U251、U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能的作用机制,初步阐明了CIB1在胶质瘤中的作用及可能机制。方法:1.下载GEO、TCGA数据库中胶质瘤基因表达谱数据,分析CIB1 mRNA在胶质瘤组织和正常脑组织中的表达情况;利用GEPIA在线数据库分析CIB1表达与胶质瘤预后的相关性。2.CIB1过表达对U251、U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响pGV492-CIB1重组慢病毒分别感染U251和U87胶质瘤细胞,CCK8、Ed U增殖实验检测CIB1过表达对U251、U87胶质瘤细胞增殖的影响;划痕实验检测CIB1过表达对U251、U87胶质瘤细胞迁移的影响;Transwell侵袭实验检测CIB1过表达对U251、U87胶质瘤细胞侵袭的影响。3.CIB1敲减对U251、U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响pGV248-CIB1-siRNA重组慢病毒分别感染U251和U87胶质瘤细胞,通过CCK8、Ed U增殖实验检测CIB1敲减对U251、U87胶质瘤细胞增殖的影响;划痕实验检测CIB1敲减对U251、U87胶质瘤细胞迁移的影响;Transwell侵袭实验检测CIB1敲减对U251、U87胶质瘤细胞侵袭的影响。4.Western Blot检测CIB1表达对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平的影响Western Blot检测CIB1表达水平对activeβ-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、Cyclin D1及c-myc表达水平的影响。结果:1.通过GEO、TCGA数据库分析CIB1 mRNA在胶质瘤组织中的表达,结果提示CIB1mRNA在Ⅳ级GBM组织中的表达高于LGG和正常脑组织;利用GEPIA数据库进行生存分析,结果提示CIB1高表达与胶质瘤患者的不良预后相关。2.CIB1过表达促进了胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭（1）CCK8和Ed U实验结果显示相比于Control和Vector组,CIB1过表达（CIB1组）显著促进了U251和U87胶质瘤细胞的增殖（P＜0.05）,而Control和Vector组的增殖无显著差异（P＞0.05）;（2）划痕实验结果显示U251和U87胶质瘤细胞中CIB1组的伤口愈合率显著高于Control及Vector组（P＜0.05）,而Control和Vector两组的伤口愈合率没有差异（P＞0.05）;（3）U251和U87胶质瘤细胞Transwell侵袭实验结果提示相比于Control及Vector组,CIB1组的侵袭细胞数明显增加（P＜0.05）,而Control和Vector两组侵袭细胞数差异无统计学意义（P＞0.05）。3.CIB1敲减抑制了胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭（1）CCK8和Ed U实验结果显示相比于Control和NC组,CIB1敲减（si-CIB1组）显著抑制了U251和U87胶质瘤细胞的增殖（P＜0.05）,而Control和NC组的增殖无显著差异（P＞0.05）;（2）划痕实验结果提示U251和U87胶质瘤细胞中si-CIB1组的伤口愈合率著低于Control及NC组（P＜0.05）,而Control和NC两组伤口愈合率没有显著差异（P＞0.05）;（3）Transwell侵袭实验结果提示U251和U87胶质瘤细胞中si-CIB1组的侵袭细胞数显著低于Control及NC组（P＜0.05）,而Control和NC两组中发生侵袭细胞数没有显著差异（P＞0.05）。4.CIB1表达水平对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响（1）Western Blot结果显示U251和U87胶质瘤细胞中CIB1组的activeβ-catenin、p-GSK-3β、Cyclin D1及c-myc蛋白表达水平显著高于Control及Vector组,P＜0.05;（2）相反,si-CIB1组activeβ-catenin、p-GSK-3β、Cyclin D1及c-myc表达水平低于Control及NC组,P＜0.05。结论:1.CIB1 mRNA在Ⅳ级GBM组织中的表达高于LGG和正常脑组织,且CIB1高表达与胶质瘤患者的不良预后相关;2.CIB1过表达促进了U251、U87胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭;而CIB1敲减则抑制了胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,提示CIB1的表达水平与胶质瘤的生物学功能相关;3.CIB1表达可以影响Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达,提示CIB1对胶质瘤细胞的功能影响可能通过Wnt/β-catenin信号通路。
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